黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究.docVIP

精品论文 参考文献 黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究 严金玲 严文华（通讯作者） 李斌 曾洁 钟声 杨人泽（赣南医学院第一附属医院 江西赣州 341000） 【摘要】 目的 观察黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的影响。方法 采用体外血浆法测定药物对凝血作用的影响。采用凝血因子分析仪测定血浆纤维蛋白原、优球蛋白溶解时间、活化部分凝血活酶时间。结果 黄花倒水莲提取物能明显缩短血浆凝血酶时间；减小凝血酶原时间；升高血浆纤维蛋白原和延长优球蛋白溶解时间；缩短活化部分凝血活酶时间。结论 黄花倒水莲提取物具有明显的促凝血作用，其促凝血作用机制可能与升高血浆纤维蛋白原和优球蛋白溶解时间；降低活化部分凝血活酶时间有关。 【关键词】 黄花倒水莲 凝血酶时间(TT) 凝血酶原时间(PT) 血浆纤维蛋白原(Fib) 优球蛋白溶解时间(ELT) 活化部分凝血活酶时间(APTT) 黄花倒水莲（PFH）又称假黄花远志，主产于湖南、广西、江西、广东和云南等地，药用其全草[1-2]。其性平、微温、味甘、微苦；具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀、调经等功效。研究表明：黄花倒水莲根含有皂苷、多糖、有机酸、氨基酸等，具有明显的抗衰老、改善心肌缺血、免疫调节、抗应激、抗衰老、抗病毒活性[3-5]等作用，主治虚弱虚肿、急慢性肝炎、腰腿酸痛、跌打损伤。有人报道黄花倒水莲提取物抗血脂作用[6]、对实验性胃黏膜损伤的保护作用、对实验性肝损伤的保护作用。现报道黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究。 1 材料和方法 1.1材料 1.1.1黄花倒水莲提取物的制备 取干燥黄花倒200g，加双蒸水过液面2cm，煮沸2次。30min/次，合并滤液，浓缩至400ml。加3倍量95%的乙醇，放冰箱静置过夜，次日减压过滤，并回收滤液中乙醇，继续浓缩滤液得无醇味的提取物。提取物加双蒸水至200ml使药液为相当于生药1g/ml。用0.5%NaOH调整pH为7.0。置冰箱中备用。 1.1.2试验动物 健康成年SD大鼠（江西中医学院实验动物中心提供），体重300～400g，雌雄各半，随机分组。 1.1.3药品与试剂 10%的水合氯醛（国药集团化学试剂有限公司，批号；枸橼酸钠(1:9)真空采血管（江西富尔康实业集团有限公司，批号；凝血酶原时间测定试剂盒和凝血酶时间测定试剂盒（上海太阳生物技术有限公司产品）。 统计分析：实验结果均以-xplusmn;s表示，数据进行单因素方差分析。 2 方式与结果 2.1 分组及给药 清洁级SD大鼠15只，随机分为三组：A.空白对照组；B.低剂量黄花倒水莲提取物组（1.5g/kg）；C.高剂量黄花倒水莲提取物组（3.0g/kg）。高、低剂量组每天以相应量的药物灌胃，空白对照组给予等量生理盐水灌胃，每天一次，持续5天。 2.2 黄花倒水莲提取物对体外凝血时间的测定 实验前动物禁食12h，末次给药后0.5h，以10%的水合氯醛麻醉(0.35ml/100g)，用毛细管从眼睛内眦部插入眼底，血液即进入毛细管内，直至血液从毛细管内流出，舍弃第一滴，然后取洁净玻片接一滴血(直径约5mm左右)，并按下秒表开始计时，每10-20s用清洁6号针头自血滴边缘向里轻轻拨动，观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝为止即为凝血时间，记录凝血时间。 表1 黄花倒水莲提取物对大鼠玻片凝血时间的影响（-xplusmn;s；n=5） 与空白组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。 2.3 黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间（PT）的测定 取待测血浆0.1mL，37℃水浴孵育3min，加入37℃预温的凝血活酶0.2mL，混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为凝血酶原时间值(s)。每个样品重复实验5次，取其平均值。 图1 黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间的影响 与空白组比较，*P＜0.05。 2.4 黄花倒水莲提取物对凝血酶时间(TT)的测定 眼眦取血后，暴露大鼠腹腔，分离腹主静脉，用枸橼酸钠抗凝(1：9)真空采血管自腹主静脉采血2mL，轻轻摇匀，后3000r/min离心15min，取上清液，即待测血浆。 取待测血浆0.1mL，37℃水浴孵育3min，加入凝血酶0.1 mL，混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为凝血酶时