第六章 dna损伤与修复2PPT.pptVIP

* 4．直接插入嘌呤 DNA链上嘌呤的脱落造成无嘌呤位点，能被DNA嘌呤插入酶(insertase)识别结合，催化游离的嘌呤碱基与DNA无嘌呤部位形成糖苷键。且催化插入的碱基有高度专一性、与另一条链上的碱基严格配对，使DNA完全恢复。 * 三、碱基切除修复（base excision repair，BER） 指切除和替换由内源性化学物作用产生的 DNA碱基损伤。 受损碱基移除是由多个酶来完成的。 主要针对DNA单链断裂和小的碱基改变及氧 化性损伤。 * 碱基切除修复 * 四、核苷酸切除修复 （nucleotide excision repair，NER） 体内识别 DNA 损伤最多的修复通路。 不识别任何特殊的碱基损伤，而是识别双螺旋形状的改变；修复时切除含有损伤碱基的那一段 DNA。 * 以大肠杆菌为例 UvrA:识别损伤部位 UvrB:解旋双链 紫外线诱导uvrA、uvrB、uvrC和uvrD四种基因表达 * 第六章 DNA损伤与修复 (DNA Damage and Repair) 曾海涛 中南大学生命科学学院 分子生物学研究中心 * 哺乳动物细胞DNA损伤的发生频率 DNA损伤类型 次·细胞- 1 ·天 – 1 单链损伤 55 000 脱嘌呤 10 000 脱嘧啶 200 O6甲基鸟嘌呤 3 100 胞嘧啶脱氨基 200 胸腺嘧啶乙二醇 270 胸苷乙二醇 70 * 自发性 复制错误 碱基脱落或部分脱落 活性氧 紫外线 电离辐射 烷化剂 碱基类似物 修饰剂 DNA 第一节 DNA损伤的原因及后果 病原生物基因的整合 物理因素 化学因素 * 一、DNA分子的自发性损伤 (一)DNA复制产生误差 模板 核酸外切酶活性 DNA聚合酶Ⅰ 错配碱基 * 如大肠杆菌 碱基配对的错误率为10-1-10-2 DNA聚合酶校正后错误率为10-5-10-6 复制后经校正系统校正，错配率为10-9左右 * 2. 碱基的脱氨基作用 碱基的环外氨基有时会自发脱落，从而胞嘧啶(C)变成尿嘧啶(U)，腺嘌呤(A)变成次黄嘌呤(H)。复制时,U与A配对、H与C配对就会导致子代DNA序列的错误变化。 (A) (H) (C) (U) * 3．脱嘌呤与脱嘧啶 即碱基脱落，是指从DNA上丢失了嘌呤或嘧啶，形成无碱基位点，称为AP部位（apurine,apyrimidine site, AP）。 * 复制时可以插入任何核苷酸。 脱落碱基后的脱氧核糖3’端的磷酸二酯键易被水解，造成DNA链断裂。 在哺乳动物细胞基因组中，每天每个细胞因N-糖苷键自发水解约丢失10 000个嘌呤碱基和200个嘧啶碱基。 * 4．碱基修饰与链断裂 细胞在正常生理活动中产生的活性氧会造成DNA损伤，产生胸腺嘧啶乙二醇、羟甲基尿嘧啶等碱基修饰物，还可引起DNA单链断裂等损伤。 * 二、物理因素引起的DNA损伤 (一)紫外线照射引起的DNA损伤 同一条DNA链相邻嘧啶以共价键连成二聚体(T-T、C-T 、C-C)，导致复制不能进行。 皮肤因受紫外线照射而形成二聚体的频率可达每小时5×104／细胞 紫外线不能穿透皮肤，因此损伤只局限在皮肤中 紫外线照射还能引起DNA链断裂等损伤 * 胸腺嘧啶二聚体 * (二)电离辐射引起的DNA损伤 直接效应： DNA直接吸收射线能量而遭损伤。 间接效应： DNA周围其他分子(主要是水分子)吸收射线能量而产生具有很高反应活性的自由基，进而损伤DNA。 * 电离辐射引起DNA损伤的类型 产生 ·OH自由基，导致碱基变化 脱氧核糖分解 DNA链断裂 交联 包括DNA链交联和DNA-蛋白质交联 * 　三、化学因素引起的DNA损伤 (一)烷化剂对DNA的损伤 　　1．碱基烷基化