双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用-食品科学.pdf

※营养卫生 食品科学 2017, Vol.38, No.23 171 双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用 1 1,2,* 1 1 1 1 1 郑媛媛 ，丁国芳 ，杨最素 ，余方苗 ，贾盈露 ，吴宗泽 ，陈 锐 （1.浙江海洋大学食品与医药学院，浙江省海洋生物医用制品重点工程技术研究中心，浙江 舟山 316022 ； 2.浙江省海洋水产研究所，浙江 舟山 316021 ） 摘  要：目的：探讨双齿围沙蚕抗凝血肽（anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis ，PAAP ）的制备及其 抗血栓作用。方法：以抗凝活力为检测指标，筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、 凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化，得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽，将此肽命名为PAAP并测定 其急性毒性作用。采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷 酸腺苷（adenonisine disphosphate ，ADP ）诱导的血小板聚集实验，研究PAAP 的抗血栓作用。结果：选取碱性蛋 白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解，经过分离纯化后得到一条氨基酸序列：脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸 / （Pro-Val-Glu-Arg-Lys ）。经测定，该寡肽的体外抗凝活力可达（1 320.0±20.3 ）U g 。PAAP 的最大耐受量为 11.0 g/ （kg ·d ）且未出现小鼠异常及死亡现象，体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成 及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用。结论：从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用。 关键词：双齿围沙蚕；抗凝血肽；碱性蛋白酶；分离纯化；抗血栓 Enzymatic Preparation and Antithrombotic Activity of Anticoagulant Peptides from Perinereis aibuhitensis 1 1,2,* 1 1 1 1 1 ZHENG Yuanyuan , DING Guofang , YANG Zuisu , YU Fangmiao , JIA Yinglu , WU Zongze , CHEN Rui (1. Engineering Research Centers of Marineorganisms Medical Products, School of Food and Medicine, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316022, China; 2. Marine Fisheries Research Institute of Zhejiang Province, Zhoushan 316021, China) Abstract: The present study was intended to investigate the enzymatic preparation and antithrombotic activity of anticoagulant peptides from