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肝x受体在乳腺癌中表达及对mcf-7细胞增殖的影响word论文
p300与LXRα形成的蛋白复合物,而减少p300与c-fos形成的复合物。干扰LXRα表达,显著降低T0901317对MCF-7细胞cyclin D1表达的抑制作用。结论:乳腺癌组织LXRα蛋白表达明显增高,激活LXRα能够显著抑制MCF-7细胞的增殖,这种效应与LXRα激动剂促进LXRα/p300复合物形成,降低p300/c-fos 介导的cyclin D1表达有关。关键词:乳腺癌;肝X受体;细胞增殖;细胞周期蛋白1;p300;2Expression of liver Xreceptorsin human breast canceranditseffect on proliferationof breast cancer cellline MCF-7ABSTRACTObjective:LiverXreceptors(LXR)includingLXRαandLXRβarenuclearreceptorsactivatedbyligand,whicharecloselyrelatedtometabolizeofcholesterol,fattyacid,glucoseandinflammation.Thisstudywastoinvestigatetheexpressionof LXRsinhumanbreastcancer,anditseffectandmechanismonproliferationofbreast cancer cell lineMCF-7.Methods:①TheexpressionofLXRαandLXRβinhumanbreastcancer(107cases) wereexaminedbyimmunohistochemicaltechnique,andthepositiveratesandthe changeofaveragegrayvaluewereanalyzedbymicro-imageanalysissystem. ②HumanbreastcancerMCF-7cellsmaintainedinDMEMat37℃ weretreatedwiththeLXR agonists T0901317(10μM ), theproliferation assaywas performed byMTT andFCMafter72hours. ③MCF-7cellswereexposedtoT0901317withdifferent levels(0、5、10、20μM )for24 hours orexposedto10μMT0901317 forincreasing periods oftime(0、6、12、24h). Real-time quantitative PCR(RT-PCR) and westernblottingwereusedtodeterminemRNAandproteinlevelsforcyclinD1(CD1)and cyclinE(CE).Immunoprecipitation(IP)-westernblotanalysiswasusedtodetermine thelevelsofcompoundforp300/LXRαorp300/c-fos.Ourexperimentalsoobserved theproliferationrateandcyclinD1expressionofMCF-7cellsknockdownthe expression ofLXRαbysiRNA.Results:OurexperimentsshowthattheproteinsofLXRαandLXRβwerenot obviouslyexpressedinnormalbreasttissues,butpositiveexpressionratioand intensityofLXRαhassignificantlyincreasedinbreastcancertissuesincludingductal carcinomainsitu(DCIS)andinvasiveductalcarcinoma(IDC),whileLXRβhasno3expressedinbreastcancertissues.TheMCF-7cellstreatedwithLXRagonist T0901317showeddecreasedproliferationcomparedwiththecomtrolMCF-7cells. T0901317canobviouslydecreasetheexpressionofcyclinD1mRNAandprotein levelsindose-andtime-depende
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