[工程科技]第五章 真核基因表达与调控.pptVIP

第一节 真核基因的表达 转录起始 RNA链的延伸 转录终止 转录产物的加工 RNA跨膜运输 翻译 翻译后加工 一、转录起始 分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类，分别催化合成不同类型的RNA； 均由约10个亚基组成；都有TATA盒结合蛋白（TBP）亚基； 分别识别Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ启动子； 都不能直接与各自的启动子结合，需要转录因子的参与才能与启动子结合，起始转录。 启动子：指RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制元件，包括转录起始点及一个以上的功能元件。 TATA盒； GC盒； CAAT盒 转录因子（Transcript Factor,TF） 基本（通用）转录因子 是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定转录的RNA的类别。 有TF I、TF II、TF III三类。 作用是使RNA聚合与启动子结合，进行转录起始。 基因特异转录因子 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 转录激活因子----通常与增强子结合 转录抑制因子----通常与沉默子结合 识别启动子: I 类启动子; 转录产物: 45S rRNA; I 类启动子组成: 核心元件(core element)——位于-45~+20区，富GC，起始效率低； 上游调控元件(upstream control element, UCE)，位于-156~107区，富含GC，能增强转录起始。 转录因子: 上游结合因子(upstream binding factor, UBF) 选择因子1(selectivity factor 1, SL1)——由4个亚基组成，其1为TATA盒结合蛋白(TATA box binding protein,TBP), 另3个是TBP结合因子(TBP-associated factors, TAFⅠs) 识别启动子: II 类启动子; 转录产物: hnRNA和snRNA(除U6 snRNA) II 类启动子组成: TATA盒（最基本）； GC盒； CAAT盒 转录因子: 有7种通用转录起始因子，TFⅡA、B、C、D、E、F、H、J； TFⅡD起关键作用，由1个TATA盒结合蛋白（TBP）和8~10个TBP结合因子（TAFⅡs）组成 RNA聚合酶III的转录起始 二、RNA链的延伸 因有核膜相隔，转录与翻译不同步进行； RNA-pol前移处处都遇上核小体 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚-再聚合现象 三、转录终止 RNA pol I 转录的终止 转录出45s RNA的3′-末端后，继续向下游转录超过1000bp，在rDNA基因此处有一个18bp的终止序列，在辅助因子的作用下终止转录，然后由核酸内切酶切割产生45s RNA。 RNA pol III 转录的终止 转录模板下游存在一个终止子，是一个GC丰富序列中的连续的TTTT，能被RNA pol III所识别，并终止转录； 终止点一般在第2个T位，亦可在第3、4 T位置； 因此， RNA pol III转录产物3′-末端有UU序列。 RNA pol II 转录的终止 没有明确的转录终止信号；一般会向结构基因下游继续转录数千个碱基。 结构基因的最后一个外显子3′端具转录终止修饰点：...AATAAA…… GAGAGAG… 因此转录本中(未切断前)会出加尾信号: ...AAUAAA…… GUGUGUG… 真核mRNA的poly(A)长度 约100~200nt； 少数例外，如组蛋白hnRNA和mRNA均无poly(A)尾结构。 真核生物mRNA多聚A尾的形成 hnRNA (hnRNA) 不均一核RNA，核内未被剪接有内含子的mRNA前体。 内含子(intron)的结构特点 hnRNA中的内含子大部分都以GU开始、AG结束(GU/AG规则); 5′端序列为GUAAGU (称5′端剪接点); 3′端序列为(Py)nNPyAG n≈ 10 (称3′端剪接点); 3′端上游有一个保守的A (称分支点). snRNA (small nuclear RNA) 核小RNA，与核内的某些蛋白质组成并接体（splicesome），参与hnRNA的剪接。 富含Ｕ,主要有种类：U1，U2，U4，U5，U6 snRNA等 五、RNA跨核膜运输 mRNA 在核内加工成熟后，形成紧密的二级结构，并与多种蛋白质结合成核蛋白颗粒后，穿过核膜进入胞浆； 在胞浆中，mRNA紧密的二级结构需要松解并释放结合蛋白质，才能进行翻译。 rRNA 在核仁中加成熟的rRNA与核糖蛋白组装成核糖体后，再通过主动运输过程运到胞浆。 六、翻译 翻译的场所：核蛋白体 翻译的模板：mRNA 翻译的运载工具：tRNA 翻译的直接原料：各种氨基酰- tRNAs 参与翻译的蛋白因子： 起始因子（eIF1、eIF2、eIF3…..等9种以上） 翻译的