[医学]第14章气相色谱法.ppt

14.1.1 气相色谱法的分类 按固定相状态分 气固色谱 ( GSC) 流动相是气体 固定相是固体吸收剂 气液色谱 (GLC) 流动相是气体 固定相是液体（涂在固体上或键合) 按色谱操作形式分类 柱色谱 按柱的粗细分 14.1.2气相色谱的特点 分离效率高（一次可分离上百个化合物） 分析速度快; 样品用量少 灵敏度高（ECD：10-11~10-13g） 分离和测定一次完成（可和多种波谱分析仪器联用） 易于自动化 应用范围（分析具有一定蒸气压且热稳定性好的样品） 14.1.2 气相色谱仪结构 1. 气路系统 作用：获得纯净、流速稳定的载气。 让载气连续运行、管路密闭的气路系统。 对组分没有相互作用力，只起到携带组分移动的作用 组成：压力计、流量计及气体净化装置。 选择原则：柱效、分析对象、检测器。 要求：气密、流速稳定、流量准 载气要求化学惰性，不与有关物质反应 载气种类：氦气、氢气、氮气。 载气的控制：钢瓶 减压阀 稳压阀 稳流阀 载气流速的测量与校正 气相色谱仪-进样系统 2. 进样系统 进样装置+气化室 进样系统作用：定量引入样品； 　　　　　　　加热气化，转入柱内 进样器： 微量注射器或自动进样器 气体进样器用六通阀 气相色谱-分离系统 3. 分离系统 色谱柱的作用：分离混合组分 分离柱种类：填充柱和开管柱(或称毛细管柱)。 构成：色谱柱：固定相 =担体/载体+固定液 气相色谱-分离系统- 4. 检测器(检测系统） 检测组分的存在，并将组分的量定量地转换为电信号，加以放大。 1. 热导检测器( TCD); 2. 氢火焰离子化检测器(FID) 3. 电子捕获检测器(ECD); 4. 火焰光度检测器(FPD); 5. 氮磷检测器（NPD） 6. 热离子检测器(TID)。 5. 控温系统 温度影响: 温度控制部分：柱温箱，气化室，检测器 色谱柱的温度控制方式: 恒温，程序升温。 6. 数据处理系统和记录系统 样品经色谱柱分离后，各组分按保留时间不同，顺序地随载气进入检测器检测器，把进入的组分的浓度或质量按时间的变化而变化，转化成易于测量的电信号，经过必要的放大传递给记录仪或计算机，最后得到该混合样品的色谱流出曲线及定性和定量信息。 14.2 气相色谱理论 根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组份的最少个数。 根据色谱峰的保留值(或位置）定性。 根据峰面积（峰高）定量。 色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据。 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（和流动相）选择是否合适的依据 14.2.2 色谱基本术语 (Chromatography Terms) 1.基线：在色谱分析中，当只有流动相通过而没有样品通过检测器时，记录所得到的检测信号随时间变化的曲线，应为一条直线。 3. 保留值 死时间(t0) :指不被固定相吸附或溶解的气体，从进样开始到柱后出现浓度最大值时所需时间。 死体积(V0= t0FC ) :指柱子在填充后，色谱柱管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连接头间检测器的空间的总和。 保留时间 (t r或t R) ：指被测组分从进样开到柱后出现浓度最大值时所需时间。 ④调整保留时间（t r′或t R′ ） 扣除死时间后的保留时间 tr′= 保留时间 － 死时间 tr′= tr － t0 保留体积（Vr或VR）：指从进样开始到被测定组分在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相(载气)体积。 调整保留体积（Vr‘）：某组分的保留体积扣除死体积后，为该组的调整保留体积 Vr‘= Vr - V0 4. 色谱宽度/区域宽度 数理统计用 ?来度量Gaussian 曲线的宽度 表达方式：标准偏差 半峰宽度 峰底宽度 ②半峰宽度（ W1/2 ）:峰高一半处的峰宽度 W1/2 = 2?(2ln2)1/2 =2.354 ? 单位：长度mm或cm；时间min或s；体积 ③峰底宽度:色谱峰两侧的转折点所作切线在基线上的截距 W = 4? 7、分配系数比（α）或分离因子或选择因子 3．Cu —传质阻力项 对于气液色谱： 传质阻力系数C = 气相传质阻力系数Cg+ 液相传质阻力系数CL 即 C＝Cg＋CL 对于填充柱： 气相传质阻力系数Cg df ：液膜厚度，df 小，组分在液相的扩散系数DL大，则液相传质阻力就小。 液膜厚度： ①降低固定液的含量，可以降低液膜厚度， ②但k值随之变小，又会使CL增大。