外源化学物致突变用.pptVIP

2．成套的观察项目 化学毒物的种类、结构、致突变机制、靶细胞各异 致突变物中仅少数具有直接致突变作用，大多数为间接致突变作用 化学毒物的致突变性有强弱之分 入选原则 应包括5类遗传学终点 应包括多种进化程度不同的物种 体内试验与体外试验配合 体细胞试验阳性，再进行生殖细胞试验 验证阳性结果在体内的真实性，必要时再选用生殖细胞致突变试验 利用突变体的测试菌株，观察受试物能否纠正或补偿突变体所携带的突变改变，判断其致突变性。常用的菌株有鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)和大肠杆菌(E. Coli) 二、常用的致突变试验 1．细菌回复突变试验 (Ames试验) 突变的菌株必需依赖外源性组氨酸才能生长，而在无组氨酸的选择性培养基上不能存活，致突变物可使其基因发生回复突变，使它在缺乏组氨酸的培养基上也能生长 原理 是染色体或染色单体的无着丝点断片或纺锤丝受损伤而丢失的整个染色体 2．微核试验 (micronucleus test，MNT) 可检出DNA断裂剂和非整倍体诱变剂 灵敏度与细胞遗传学试验基本相同 简易、省时 当细胞或机体受到紫外线刺激，会使DNA发生化学变化，主要产生环丁烷嘧啶二聚体和(4-6)光产物(4-6-photoproduct)。可阻止DNA的复制，并引起细胞死亡 （二）DNA链受损 1．二聚体的形成 辐射的致突变机制 使连接A-T、C-G之间的氢键断裂 DNA的一个或两个键中的糖-磷酸基之间断裂 DNA同一条链上，相邻的嘧啶形成二聚体 水电离产生自由基，引起突变 辐射使DNA双链断裂或单链断裂 活性化学物与细胞大分子之间通过共价键形成的稳定复合物，很难用一般的化学或生物学方法使其解离 DNA加合物形成可活化癌基因，影响调节基因和抑癌基因的表达 2．DNA加合物形成 是一种稳定的共价结合物 不同的化学物引起DNA-蛋白质交联物的交联有所不同 对DNA构象与功能产生严重影响 烷化剂、B(a)P、砷化物、醛、重金属 3．DNA-蛋白质交联物形成 (DNA-protein crosslinks，DPC) 非整倍体和多倍体是由于染色体分离异常而产生 二、引起突变的细胞分裂过程的改变 细胞分裂过程的改变：纺锤体，微管蛋白的合成与聚合，微管结合蛋白合成与功能发挥，细胞分裂纺锤纤维的功能发挥，着丝粒与之有关的蛋白质作用，极体复制与分离，减数分裂时同源染色体联合配对和重组 非整倍体细胞由正常细胞未分裂而产生，结果是纺锤体的一极接受了同源或两个染色单体，而另一极则没有 同源染色体减数分裂I期不能适当分离 姐妹染色体在减数分裂Ⅱ期，或有丝分裂期不能适当分离 多倍体涉及整个染色体的情况 染色体分裂时，染色体单体不能分离，产生一个4倍体细胞 配子为2倍体，产生一个多倍体的受精卵 一个卵子被一个以上精子授精 微管蛋白二聚体是构成纺锤体的基本成分。如其某一特定位置被占据，将妨碍微管的正确组装，导致细胞分裂被抑制 秋水仙碱即可与该结合部位结合，导致细胞染色体不分离 1．与微管蛋白二聚体结合 非整倍体与多倍体产生机制 化学毒物与微管蛋白的巯基特异性结合，影响微管的作用。不同化学结构的物质，与微管蛋白不同部位的巯基结合 2．与微管上的巯基结合 苯基汞与着丝粒微管结合，甲基汞与极间微管结合，将造成多种后果。通常是使细胞分裂部分抑制，即造成非整倍体 秋水仙碱，灰黄霉素，长春花碱可与微管结合蛋白结合，结合点和作用方式不尽相同，都可使已组装好的微管解聚 非特异性作用微管，使其蛋白质变性，使微管失去定向能力 化学毒物破坏微管的方式 3. 已组装好的微管的破坏 秋水仙碱妨碍有丝分裂早期两对中心粒的分离和移向两极 N2O 使组装好的微管破坏，中心粒位置不正常等现象，机制不明 4．中心粒移动受阻 5．其他作用 1．DNA的高保真复制过程中的任何一个环节损伤，将影响DNA复制的高保真性，有可能引起突变 三、其他的改变 2．DNA修复过程是清除受损伤的DNA片段，并合成新的片段来替换的过程。修复过程依赖多种酶 四、突变的后果 致死性突变：影响后代的数量 1．生殖细胞突变 显性：使精子不能受精，或合子在着床前死亡或着床后早期胚胎死亡 隐性：需纯合子或半合子才能出现死亡。如果是杂合子则不出现死亡 显性遗传：造成下一代遗传病发生率增加或新病种出现； 隐性遗传：增加下一代基因库的遗传负荷 非致死性突变：影响后代的质量 基因库（gene pool） 遗传负荷（genetic load） 某一物种在特定时期中能将遗传信息传至下一代的处