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(3)推测两亲本白花植株的杂交组合(基因型)是 或 ;用遗传图解表示两亲本白花植株杂交的过程(只要求写一组)。 (4)紫花形成的生物化学途径中,若中间产物是红色(形成红花),那么基因型为AaBb的植株自交,子一代植株的表现型及比例为 。 AAbb×aaBb 其他省市也有 Aabb×aaBB 紫花:红花:白花=9:3:4 专题三:限制性内切酶及相关试题分析 (1 ) 限制酶的基本知识(回忆复述,自我建构) 在做有关限制酶的试题时,要注意几点:①限制酶的专一性:迄今已从近300种不同的微生物中分离出了约4000种限制酶,每一种限制酶只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。②要注意某种限制酶具体识别的序列和切割位点。③要注意黏性末端,有时由两种不同的限制酶也可以切出相同的黏性末端,只要黏性末端相同,则它们就可以通过DNA连接酶连接起来。④限制酶切出的如果是一个无黏性末端的平口(平末端),则任两个这样所切出的DNA片段都可以通过DNA连接酶将其连接起来。 (2 )相关试题分析 例1:一个DNA分子用限制酶切割,获得一个目的基因。有几个磷酸二酯键被水解( ) A.1 B.2 C.3 D.4 析:一个DNA分子用限制酶切割,如DNA分子上只有一个限制酶切割的位点,结果只能将DNA分子切割成两段。故要获得一个目的基因,该目的基因的两侧必须都要有限制酶切割的位点,又由于DNA分子为双链,所以切割时应有4个磷酸二酯键被水解。 答案 D 例2:(2007广东高考试题)现有一长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by,用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子,用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA 分子的酶切图谱正确的是( ) 答案 D 例3:(多选)某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序列,用该限制酶切割该DNA分子,可能形成的两个DNA片段是( ) 答案:CD 例4:(2008年江苏卷)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。 请根据以上图表回答下列问题。 (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是 。 (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度?_______。 (3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求? 。 耐高温 引物对B 否 (4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为 。 (5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。 ①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到 种DNA片断。 ②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到 种DNA片断。 农杆菌 2 1 例5:(2010年江苏卷)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题: (1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有 个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Srna Ⅰ切割,原因是 。 (4)与只使用EcoR I相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。 0、2 高 SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。 (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 (7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋
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