自我复制性核酸疫苗.pdfVIP

中国生物制品学杂志2005年9月第18卷第5期ChinJBidogicals No．5 Se障lllb目20c15，Vo!．】8 【综述】 自我复制性核酸疫苗 李卫华综述赵连三审校 迄今，核酸疫苗免疫诱导效力偏低，是限制其实 合成为一种能进行自身水解的多聚蛋白。多聚蛋白 际应用的原因之一。尽管目前发展了许多策略，在 不同程度上提高了核酸疫苗的免疫效力，但仍然未 它们是自身转录和复制所需的酶，启动自身RNA的 达到可供实用化的理想效果。而且，质粒载体长期 在宿主细胞中存留，存在着可能与宿主细胞染色体 这些酶蛋白的作用下，以正链RNA为模板，合成全 DNA随机整合和细胞转化的潜在危险…。此外，外 源基因在体内长期高水平表达，可能会刺激机体产 生抗DNA抗体，导致自身免疫病或免疫耐受等问 RNA为模板，合成子代基因组正链RNA和编码病毒 题【2】。所以，提高核酸疫苗在机体内的表达水平，加 结构蛋白的mRNA，经过翻译合成病毒的结构蛋白。 强其免疫效力，同时又能保证核酸疫苗的安全性，已 在此过程中，以正链RNA为模板合成全长负链 成为核酸疫苗研究中的关键问题。 RNA的反应可持续不断地进行，从而转录出大量的 forest 近年来，利用塞姆利基森林病毒(Semliki 结构蛋白编码基因的mRNA拷贝，指导合成大量的 virus，SFV)R／qA复制子(非结构蛋白编码序列NSl．蛋白(图1)口】。倘若用编码抗原的目的基因取代结 NS4)构建具有自我复制能力的核酸疫苗，已引起了构蛋白基因，则可构成强大的以复制酶为基础的核 国内外研究者广泛的兴趣。SFV是RNA病毒【3】。酸疫苗。 SFV表达系统在感染细胞中可以高效表达异源性 RNA或蛋白质，并在复制过程中诱导宿主细胞的凋 呲田飘盔田i墨Foil囤 亡【4J。根据SFV的这些特点，构建含有编码SFV RNA复制酶基因和目的抗原基因的核酸疫苗，能够 揣。”，陋军团皿≮：j-呷墨圃卅黼妒， 。……1 ：：一～J～～ 实现“自我复制”，生产出大量的目的抗原。本文就 ； “自我复制”核酸疫苗的特点、与传统的核酸疫苗相 ‰甜罐蚕一沸柚_ 比具有的优势、在加强免疫应答中的作用以及产生 高效免疫诱导效应的机制等方面进行综述。 1．SFv的生物学特征 图1 自我复制核酸疫苗编码外源抗原 SFV属披盖病毒科家族中的甲病毒属，为正链 RNA病毒，有脂质被膜。SFV具有广谱的宿主范围， 2．“自我复制”核酸疫苗的特点 能感染哺乳动物、禽、爬行动物、两栖动物以及昆虫 等多种类型的细胞bJ。SFV基因组为单股正链 制过程依赖自身所编码的酶，不依赖于宿主细胞的 RNA，长约12l(b，57端有帽状结构，3’端有多聚A 核酸复制酶系统，这是SFV区别于其他病毒的显著 A)。基因组编码9个功能蛋白。3’端为结构 (poly 蛋白编码区，编码病毒的核心蛋白(C)和包膜蛋白 (EZ、E2和E3)，参与病毒颗粒的组装【6]。5’端为非 到真核生物表达载体启动子(如CMV早期启动子) 结构蛋白编码区(NSl一NS4)，编码4个非结构蛋白 的下游，可构建具有自我复制能力的重组核酸疫苗 (NSPl4)，主要与病毒的自身转录和复制有关。 SFV感染宿主细胞后，NSI．NS4序列首先翻译