siRNA对恶性黑色素瘤A375细胞中HOXB7基因的干涉作用研究.docVIP

siRNA对恶性黑色素瘤A375细胞中HOXB7基因的干涉作用研究 ? 3I2?中国肿瘤临床2007年第34卷第6期 siRNA对恶性黑色素瘤A375细胞中HOXB7基因的 干涉作用研究水 摘要目的:观察靶向siRNA抑制恶性黑色素瘤细胞株A375同源盒基因HOXB7表达后,对相应生长因子 bFGF表达水平及A375细胞生物学特性的影响方法:根据HOXB7基因设计3条序列特异性的siRNA(si—HOXB7一l, si—HOXB7—2.si—HOXB7—3).在脂质体Lipofectamine2000的介导下转染A375细胞,采用R.r—PCR和FCM法来观察 HOXB7及bFGF的基因沉默效应:M法检测A375细胞体外增殖活性结果:3备sjRNA均能不同程度地下调 A375细胞HOXB7表达水平.第3条序列能更有效地封闭HOXB7基因.而空转组与对照组相比差异无统计学意义 (Pgt;0.05)结论:靶向HOXB7基因的siRNA可有效沉默HOXB7基因及其调控的基因lWGF的表达.并控制恶性黑 色素瘤细胞的生长 关键词siRNAHOXB7bFGFA375细胞株 中图分类号:R739.5文献标识码:A文章编号:l000—8l79(2007)06—03l2—04 EffectofsiRNATargetingtheHOXB7GeneinHumanMalignant nelanomaA375Cells PengSidaGeLinhuWangChunyanetal CenterforOncologyamp;Hematolog).theFirstAffiliatedHospitalofGuangzhOLt MedicalCollege,Guangzhou AbstractObjective:ToobservetheinfluenceofsmallinterferingRNA(siRNA)targetedagainst theHOXB7geneonexpressionofHOXB7andbFGFandotherbiologiccharaeteristit?SintheA375 malignantmelanomacellline.Methods:Threesequence—specificsiRNASfsi—HOXB7—1.si-HOXB7— 2,Si-HOXB7—31weredesignedbasedontheHOXB7genesequenceandweretransfectedintoA375 cellsbylipofeetamine2000induction.GenesilencingeffectsofHOXB7andbFGFwere,bserve(1using RT—PCRandflowcytometry.M几,eolorimetrywasusedtodetectcellproliferativea(.ti,titvinvitr0. Results:TheexpressionofHOXB7inA375cellscouldbedownregulatedinvauingdegreesI1vthe3 siRNAS.The3rdsiRNAcanmosteffectivelyblockexpressionoftheHOXB7gene.SOthereWasno significantdifferencebetweenthefree-runninggroupandthecontrolgroup(Pgt;0.05).Conclusion:siR— NAtargetingtheHOXB7genecaneffectivelydownregulatetheexpressionofHOXB7antiitsdown— streamgenebFGFandrepressproliferationofA375cells. KeywordssiRNAHomeboxB7BasicfibrolastgrowthfactorA375cellline HOXB7基因属于同源盒基因,定位于17号染 色体上,是一种转录调控因子,在进化上有着高度保 本文课题受广州市科技局立项基金资助(编号:2004Z2一E0011) ①胸外科 通讯作者:谭获tanhuo@public.guangzhou.gd.cn 守的DNA序列,对胚胎发育,细胞分化等过程发挥 重要作用1.有研究报道,HOXB7基因在恶性黑色 2007年第34卷第6期siRNA对恶性黑色隶瘤A375细胞中HOXB7基因的干涉作用研究?313? 素瘤细胞株中普遍高表达,可特异性诱导bFGF, GROa,VEGF等血管生长因子表达水平上调,从而 促使肿瘤新生血管形成,并促进肿瘤细胞进一步增 殖与转移.因此,HOXB7基因可做为基因