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第七章 免疫诊断与防治推荐
疫苗的应用 * * * 新型疫苗及其发展 * 基因工程疫苗 *重组抗原疫苗:用DNA重组技术制备只含保 护性抗原的纯化疫苗。 疫苗不含活病原体和病毒核酸,安全有效,成本低 *重组载体疫苗:将编码病原体有效免疫原的基因插入载体 (病毒或细菌)的基因中,接种后随疫苗株在体内增殖而表达抗原 * DNA疫苗:将编码病原微生物有效的免疫原的基因插入到细菌质 粒 DNA中,建成重组质粒,再将其导入 组织细胞,使其表达保护性抗原,产生特异性免疫。如:HIV的疫苗 * *转基因植物疫苗:将编码病原生物有效蛋白抗原基因和高表达 的质粒一同植入到植物的基因中,产生的转基 因植物,食用后能产生免疫力 * 细胞因子基因工程疫苗:将某些细胞因子(如IL-2、4、IFN-r、 TNF等) 导入肿瘤细胞,诱发肿瘤抗原的递呈,活化肿瘤 特异性淋巴细胞,达到抗瘤目的 * 根据某些特定传染病的疫情监测和人群免疫状况分析,按规定的程序有计划地进行人群预防接种,达到控制和消灭传染病的目的,称计划免疫。 (四)、计划免疫 * * 第二节、免疫治疗 * 免疫系统 免疫应答 免疫耐受 免疫防御 免疫监视 免疫自稳 免疫调节 超敏反应 免疫缺陷或免疫低下 肿瘤 自身免疫病 移植排斥 免疫治疗 * 1.免疫治疗基本概念 各种治疗因子 调节免疫功能 直接发挥免疫效应功能 治疗疾病 * 2. 分类: 免疫增强疗法 免疫抑制疗法 感染、肿瘤、免疫缺陷 超敏反应、自身免疫病、移植排斥、炎症 * 免疫治疗的方法 细胞治疗 分子治疗 生物应答调节剂 与免疫抑制剂 * 分子 治疗 分子疫苗 合成肽疫苗、重组载体疫苗和DNA疫苗可作为肿瘤和感染性疾病的治疗性疫苗 抗体 多克隆抗体—抗感染的免疫血清、抗淋巴细胞丙种球蛋白; 单克隆抗体与基因工程抗体—抗细胞表面分子、CK单抗及抗体靶向治疗 细胞因子 外源性CK治疗—如IFNa对毛细胞白血病疗效显著;IFNb可延缓多发性硬化症 CK拮抗疗法—如用TNFa单抗治疗类风湿关节炎;rsIL-1R可抑制器官移植排斥 微生物 抗原疫苗 人类许多肿瘤与微生物相关,如HP或HPV,使用这些微生物疫苗或抗病毒制剂可防治相应肿瘤 * tumor prodrug drug toxin radioisotope Enzyme * 细胞 治疗 过继免疫治疗 细胞疫苗 造血干细胞移植 包括肿瘤细胞疫苗(灭活、异构)、基因修饰的瘤苗、DC疫苗。 取自体淋巴细胞经体外激活、增殖后回输患者,直接杀伤肿瘤或激发机体抗肿瘤免疫,如TIL和CIK。 是癌症、造血系统疾病、自身免疫病等的重要治疗手段,可取自骨髓(杂质多,纯化困难)、外周血(数量少,必须先骨髓动员)和脐血。 * TIL(tumor infiltrating lymphocytes) 从切除的瘤组织或癌性胸腹水中分离淋巴细胞,体外经IL-2诱导激活扩增 * 三、生物应答调节剂与免疫抑制剂 生物应答调节剂指具有促进或调节免疫功能的制剂,通常对免疫功能正常者无影响。已广泛用于肿瘤、感染、自身免疫病、免疫缺陷病等的治疗。 * 免疫抑制剂能抑制机体的免疫功能,常用于防止移植排斥反应的发生和自身免疫病的治疗。包括化学合成药物(糖皮质激素、环磷酰胺、硫唑嘌呤)、微生物制剂(CsA、FK-506、MMF、RAPA)。 * * 免疫磁珠分离法 包括直接法和间接法。 直接法是将特异性抗体与磁性微粒(平均直径小于1.5μm)交联,形成免疫磁珠(IMB)。IMB与表达相应膜抗原的细胞结合,用强磁场分离磁珠结合细胞与磁珠非结合细胞,从而对特定细胞进行阳性或阴性分选。 间接法是用羊(或兔)抗鼠IgG抗体(第二抗体)包被磁性微珠,可与任何已结合鼠源性单克隆抗体(第一抗体)的细胞发生反应,从而对细胞进行分离。 * 磁分离技术原理: * 流式细胞术(Flow Cytometry, FCM) 是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。 * 流式细胞仪实验方法 * ?细胞分选 * 细胞凋亡研究 * * 血液学应用:包括DNA倍体分析及细胞周期分析,淋巴细胞亚群测定,白血病免疫分型,淋巴瘤免疫分型,红细胞疾病诊断,血小板功能分析和血小板病诊断,微小残留白血病检测,白细胞吞噬功能测定,NK和LAK细胞活性测定,造血干/祖细胞测定等 * 胞内细胞因子的检测: * 淋巴细胞的功能检测 ?T细胞功能检测 B细胞功能检测 NK细胞活性测定 * 1、
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