ep对肾小球系膜细胞mmp9 colⅳ表达的影响word格式论文.docx

目录中文摘要................................................................................................................1英文摘要................................................................................................................3常用英文缩略词表................................................................................................4前言........................................................................................................................7材料与方法............................................................................................................16结果........................................................................................................................28讨论........................................................................................................................31结论........................................................................................................................32参考文献................................................................................................................37致谢........................................................................................................................38综述........................................................................................................................47EP对肾小球系膜细胞MMP-9、ColⅣ表达的影响研究生：林姿导师：黄国良教授摘要目的：观察丙酮酸乙酯（EP）对大鼠肾小球系膜细胞株(HBZY-1)MMP-9、ColⅣ 表达的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：体外培养HBZY-1，以不同浓度葡萄糖及不同时间作用HBZY-1，聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测MMP-9、ColⅣmRNA表达；加入不同浓度EP、PDTC（NF-κB特异性抑制剂）及作用不同时间干预，RT-PCR 和免疫印迹法（westernblotting）方法分别检测MMP-9、ColⅣmRNA 和蛋白表达；细胞免疫荧光方法检测NF-κBp65 蛋白表达。结果：（1）随着干预葡萄糖浓度增加及作用时间延长，MMP-9mRNA的表达下调（P0.05），ColⅣmRNA的表达上调（P0.05），作用呈量效、时效关系。（2）加入不同浓度的EP、PDTC干预体外高糖培养HBZY-124h，MMP-9mRNA和蛋白的表达逐渐增加（P0.05），ColⅣ mRNA和蛋白的表达逐渐下降（P0.05），EP5mmol/L与10mmol/LMMP-9、ColⅣ 表达相近，提示5mmol/L EP可能为其最佳作用浓度。(3)5mmol/L EP作用体外高糖培养HBZY-1 不同时间（12-48h），随着作用时间延长，MMP-9 mRNA和蛋白的表达上调（P0.05），ColⅣmRNA和蛋白的表达下调（P0.05），作用呈时效关系。（5）高糖作用下NF-κB荧光信号从胞浆转移到胞核，EP、PDTC阻断了NF-κB信号的核转位。结论：（1）高糖调节