f35h基因超表达载体构建及转化菊花的初步研究word格式论文.docx

F3’5’Hhomolog(petuniaHf1,Hf2,andcinerariaF35H),weobtained12experimentalcombinations.AllbutfanyuncaiguiinfectedwithLBA4404-Hf1showedpositiveresultsofgeneticmodification.However, onlyfenqiuinfectedwithLBA4404-F35Hwasabletoyieldgeneticallymodifiedseedlings.Ofthe21 seedlings,14containedthetargetgene.Blue-violetcalluseswereobservedduringthetissuecultureprocess.WeusedPCRtechniquestoexaminethesecalluses,extractedpigmentsfromthem,measuredabsorptionspectraofthepigments,andconductedacidtestsonthepigments.Theresultssuggestthatthesecalluseswerecausedbytheaccumulationofdelphinidinproducedbytransgenictissues.Meanwhile,inordertoprovidereferenceforF35Hgenefunctionstudy,wealsohavedonesomeexperimentswithArabidopsisthalianamediatedbyAgrobacteriumtumefaciens.KEYWORDS:F35H;transformation;chrysanthemum;tissueculture缩写词英文缩写英文全称中文名称2,4-D2,4-dichlorophenoxy2,4-二氯苯氧乙酸6-BA6-Benzylaminopurine6-苄氨基嘌呤ACactivatedcarbon活性炭ASAcetosyringone(3,5-dimethoxy-4-hydroxy-acetophenon)乙酰丁香酮（3,5-二甲氧基-4-羟基笨乙酮）CarbCarbenicillin羧苄青霉素DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜dNTPDeoxynucleotidetriphosphates(usuallyamix ofdATP/dTTP/dCTP/dGTP)三磷酸脱氧核糖核苷（dATP/dTTP/dCTP/dGTP的混合物）EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸HygHygromycin潮霉素IBAIndole-3-Butytricacid3-吲哚丁酸KanKanamycin卡那霉素NAA1-naphthlceticacidα-萘乙酸PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应PEGpolyethyleneglycol聚乙二醇PPOPolyphenoloxidase多酚氧化酶PVPPolyvinylpyrrolidone聚乙烯吡咯烷酮RifRifampicin利福平RT-PCRReversetranscription-PCR逆转录聚合酶链式反应SDSSodinmdodecylsulfate十二烷基磺酸钠StrStreptomycin链霉素TrisTris(hydroxylmethyl)amino-methane三（羟甲基）氨基甲烷VII1 前言1.1 菊花简介菊花(Dendranthemamorifolium)原产自中国[1]，为菊科、菊属多年生宿根草本植物，是我国十大传统名花之一，与梅、兰、竹合誉为“四君子”，并与香石竹、月季、唐菖蒲合称为“四大切花”，且居“四大切花”之首[2]，占全球切花总量的60%以上，在国内外市场的需求量与日俱增[3]。菊花的适应性很强，在我国各地广为栽培。由于它不畏风霜、花姿高雅、花色多样、花期长，故具有很高的观赏价值，常常用于园林的绿化和观赏。其次，菊花还具清热解毒功能，可作饮料和药物[4,5]。因而不断培育出新型菊花品种，具有实用及经济价值。1.1.1菊花花色花色是菊花的主要观赏性状之一，传统的菊花花瓣颜色不仅有黄、白、紫、红、粉、雪青等多种颜色[6]，并且有各种奇异的花色类型，比如双色、间色、染瓣和变色花等[7]。裸子植物(gymnosperm)的“花”是绿色的[8]，绿色应为最原始的花色。花色的进化符合阳光的光谱特征，即花色以绿色为起点，向长光波方向进化为黄色到橙色，最后