fe3o4纳米磁流体热疗增加鼻咽癌cne2细胞 大细胞肺癌h460细胞放疗敏感性的研究word格式论文.docx

目录英文缩略词表 1中文摘要 2ABSTRACT4前言 6材料与方法 9实验结果 25结论 40讨论 41参考文献 44综述 49致谢 64英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称TEMtransmission electron microscopy透射电子显微镜XRDX-ray diffractionX 射线衍射FTIRfourier transform infrared spectroscopy傅里叶变换红外光谱VSMvibrating sample magnetometer振动样品磁强计TGAthermo gravimetric analyzer热重分析仪nmnanometer纳米NPnanoparticle纳米粒MFHmagnetic fluid hyperthermia磁流体热疗ODoptical density光密度MTTmethylthiazoltetrazolium噻唑蓝EDTAethylene diamine tetraacetic acid乙二胺四乙酸PBSphosphate buffered saline磷酸盐缓冲液TBStris buffered saline三异丙基乙磺酰缓冲液TBSTtris buffered saline with tween含吐温的 TBSBSAbovine serum albumin牛血清白蛋白DMSOdimethyl sulphoxide二甲基亚砜PIpropidium iodide碘化丙啶CLSMconfocal laser scanning microscope激光扫描共聚焦显微镜PAApolyacrylic acid聚丙烯酸AMF:alternative magnetic field交变磁场DSBsdouble strand breaksDNA 双链断裂SERsensitization enhancement ratio放射增敏比PEplanting efficiency接种效率SFsurviving fraction存活分数DIDeionization water去离子水Fe3O4 纳米磁流体热疗增加鼻咽癌 CNE-2 细胞、肺大细胞癌H460 细胞放疗敏感性的研究华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心 硕士研究生：马佳导师：杨坤禹 教授中文摘要【目的】合成水溶性、稳定性好的 Fe3O4 纳米团簇磁流体，探讨该纳米磁流体在 交变磁场的作用下热疗的效果，对放射治疗的协同增敏作用以及可能的机制。【方法】用多元醇法制备出水溶性和稳定性均较好的 Fe3O4 纳米团簇磁流体，通 过 TEM、XRD、FTIR、VSM、TGA 等方法对 Fe3O4 磁纳米颗粒进行表征；红外 线测温仪测量不同浓度的 Fe3O4 磁流体在交变磁场下升温情况；细胞水平上，以 低分化人鼻咽癌细胞系 CNE-2 和人大细胞肺癌细胞系 H460 为实验对象，CLSM、 倒置显微镜、以及 TEM 观察细胞对纳米粒的摄取情况；MTT 检测该纳米颗粒的 生物相容性及纳米磁流体热疗、放疗和热疗联合放疗对细胞增殖的影响；流式细 胞仪检测经过上述处理前后细胞凋亡和细胞周期分布的变化； γ-H2AX 焦点实 验和克隆形成实验检测磁流体热疗是否有放疗增敏效果；Western Blot 实验检测 在磁流体热疗、放疗、热疗联合放疗后热休克蛋白 70（HSP70）和半胱氨酸天冬 氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达情况。在动物水平上，建立人大细胞肺癌（H460） 裸鼠皮下移植瘤模型，绘制肿瘤生长曲线，探讨磁流体热疗联合放疗对肿瘤生长 的影响。【结果】成功合成出水溶性和稳定性较好，粒径在 50-60 nm 之间、粒径较均匀、 形态呈圆形或类圆形的纳米颗粒团簇。通过 XRD、FTIR、TGA 等检测方法可证 实合成的为 Fe3O4 纳米颗粒，并且 PAA 的羧基螯合在 Fe3O4 表面，通过 VSM 及 XRD 证明 Fe3O4 为超顺磁性纳米颗粒，饱和磁化强度为 13 emu/g，平均粒径为 7.33 nm；不同浓度的磁流体（200 μg/mL-2 mg/mL）在交变磁场作用下 1 h，温 度均能快速地上升，且有浓度依赖性:浓度越高，温度上升越高、上升速率越快,40-45 min 后温度保持恒定；纳米颗粒可被细胞吞噬，分布在细胞质中，围绕在细胞核的周围；Fe3O4 有较好的生物相容性；磁流体热疗，放疗 4 Gy, 磁流体 热疗联合放疗的作用下，CNE-2 细胞系增殖抑制率分别为 30%、29%、38%，H460 细胞系增殖抑制率分别为 25%、27%、43%；流式细胞仪检测在磁流体热疗、放 疗，磁流体热疗联合放疗作用下，CNE-2 细胞凋亡率分别为 19.04%、12.91%、 28.9