家兔日本血吸虫先天性感染及其保护性免疫的分析-analysis of congenital infection of schistosoma japonicum in rabbits and its protective immunity.docx

本研究以家兔为动物模型对家兔怀孕不同时期培行人工感染不 IiiJ 数量 门本皿吸虫尾蝴p 观察1f-兔血吸虫感染的↑自况 a材料和方法16 只新西兰母兔y 分为 3 组 UJl饪娓早期(怀孕 8-10 夭)， M 纽奸娓中 lti (怀孕 14-16 天)和 L组娃振后期 f 怀孕 21-26 天〉 同时设在常兔 4 只作 为对昭组 每组经皮肤分别人工感染 Z∞条或凶0 条门本血吸虫尾倒!行兔 出主后 f 感染后第九周剖杀 r，j:兔}经主动脉灌洗--肝门静脉收集成，1\记数、 11肮虫卵 U数观察母兔感染情况同时枪测岳组仔免失回只感染血吸虫病情况已如收集粪便检查虫卵，采集血清用 ELlSA 检测持异性抗体】gM ，虫卵 抗原 SEA(l ， 1αJO) 和成虫抗原 (AW，气)(1，100) 棍合抗原作为靶抗原 剖杀部分仔兔(抗体 IgM 阳性反应 6 儿1 阴性反应 42 只〉检费收集!l!体 观察肝胆病理变化!统计结果?并用 t 捡驳分忻结果 a结果:11常兔徨1娃嫁期为 29-31 大二个实毯纽(芷在， M 组和 L 组)母 兔均感染血吸虫，感染 600 条尾蚓的辱负检虫数均高于 200 条尾黝组 d收集仔兔血清曲份进行 ELlSA 检测 IgM 抗体， EUSA 的阳性判定阙值 经枪测 OD 值为 0.334血洁检查结果E 纯、 M 组和 L 组 IgM 阳性率分别 为 17.9% (5咽)、 5.9% (1/17)和州% (6/15)0 L 组到J母兔怀孕 21-26 天 感染组所产下仔兔感染率明显高于主组(怀孕 8-10 天〉和IM #I (怀孕 14-16 日用i/ l-阳情 (PO.O引。母兔感染 200 条尾蝴所产下的仔兔感染率为 0-1%.而感染 60(] 条尾拗所产下的仔兔的感染率为 22.2% ，两者无明思差异(PO.05)。将二个实验组的部分仔兔子感染后26 周1i?杀，经主动脉游流~ JIi-门静脉收集成虫!发现 I由f 抗体阳性仔兔 5 只均找到)，2 条雄虫!未发育 成熟!另有只仔兔找到 1对雌雄合也成熟成虫 肝脏有明显的虫卵结 1)病 堪变化:抗体 IgM 阴性 42 只仔兔均未发现童虫?1，漠虫 60 7!.仔免粪检虫卵 阴忡。2结论此项研究结果址 步农明都兔先穴性描染 H本血吸虫存在，并且显小了 日本血吸虫垂直传播最引发生在怀孕第 8-10 大仔兔肩章染率受到母兔怀孕不 同阶段的影响勺胚胎发育;另峦切相关 感染剂量似乎影响不大 地个结果小 仅村家兔而且对其他哺乳动物有可于包括人有其栅关的重要意义。由 J 家兔和 人的胎做结构有其相似 ζ处，有可能提示了人的日本山吸虫先大感染的存在第二部分1 日本血吸血先天性感染仔兔的优攻击 感染保护性兔疫的研究(fhe Effects of a Patent Congenital Infection on a PO号 tnatal Challenge Infection in Rabb、t Kittens)日的地步调盒对 H 本血吸虫经胎盘感染后的仔兔进行攻击感染 观察其保护性 免疫结果并以奇生虫学免疫学、病理堂的参数作为指标，初， F 评价免疫保 护力.材料和方法实验动物 i 上这出生后 16 周仔兔分为=组A 组感染纽. 4只先天性感染f了 兔 (lgM 抗休阳性); B 组暴露组2 片仔兔 IgM 抗体阴性， C 组对照组. 3 只同龄仔兔?其母兔未曾感染血吸虫病。各组实验仔兔均经皮肤感染日本血 吸虫尾自由 100 条?攻目时感染 45 天后. 3 组行兔全部剖杀收集虫休记结在 d 取肝 组织 5 克磨碎?加入 5%KOH 消化在 4 C过侥，然后取混走去液也i 哑微镜下 做虫卵记敛，统 H 每克盯姐织虫卵数 (EPG); 肝组织病理坐观察取肝组织块置 10%榈尔马林溶液中 p 石蜡包埋!组织切片. HE 染色 置，TI\彼镜下 现统分析!虫卵肉芽肝大小测定 p 洲最以单个虫卵为中心的肉芽肿 何张切 儿随机测量 5 个虫卵肉芽肿的直径和而积。血样标本收集分离血清宣 20-C 保存备用，采用 EUS凶方法以 SEA+SWA混合抗撮，测定血浩特异抗体 IgG 和 IgM. 抗体依赖细胞介悖的细胞毒性试3钟时lI$ ， 学院常土学位论义验 (ADCC)血请收集5 组仔兔血清收集备用即上尬 A ，?，C 三 另外 D 纯为先王性感染仔兔并检获成虫仨细为常用龄仔兔 问本血吸虫童虫制备拍照 Ramalho-F气方法，新鲜逸尾蝴 400 条背 lìj:i爷 4-8C 30 分钟!特尾她沉积丁瓶底!然后来回震荡IDi.R.，离。回 Orpm ，15m川 去摊上消液中的尾部!底部血吸虫重虫孵育在 3TC 2h