hif1α对一次性运动骨骼肌errαγ蛋白表达的影响-effect of hi f1 α on expression of err α γ protein in one-time exercise skeletal muscle.docxVIP

目录1前言12文献综述23实验内容213.1实验动物213.2实验分组213.3运动方式213.4取材223.5实验试剂、仪器和方法22论文随机验证编号：BT528541615430-1-3.5.1骨骼肌核蛋白提取、核蛋白浓度及Westernblot测定223.5.2骨骼肌mRNA表达量的测定263.6数据统计274实验结果284.1不同时间一次性耐力运动对HIF-1α转基因小鼠骨骼肌核蛋白ERRα表达的影响284.2不同时间一次性耐力运动对HIF-1α转基因小鼠骨骼肌核蛋白ERRγ表达的影响294.3不同时间一次性耐力运动对HIF-1α转基因小鼠骨骼肌MCAD、NRF1及PPARαmRNA表达的影响315分析讨论325.1不同时间一次性耐力运动对阴性对照小鼠骨骼肌核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因表达的影响325.2不同时间一次性耐力运动对HIF-1α转基因鼠骨骼肌核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因表达的影响346结论36致谢37参考文献38论文随机验证编号：BT528541615430-2-1前言脂类物质作为体内三大能源物质之一，它的正常的代谢能够维持机体内环境的稳定，当脂代谢发生异常时则会出现一系列的疾病。众所周知，运动有利于健康。运动可以对包括肥胖、Ⅱ型糖尿病、代谢综合征，神经退行性疾病、心血管疾病和癌症等的临床症状有积极影响[1-3]，另一方面，不活动也会对这些疾病的症状产生消极影响[4]，但运动对机体代谢及代谢性疾病的具体影响机制并不十分清楚。低氧诱导因子（HIF-1，hypoxia-induciblefactor1）是一种氧依赖性的转录调节因子，当机体处于低氧环境中，对外界环境的低氧反应起重要作用。近来，有研究表明HIF-1α与肥胖相关的代谢疾病有关。在肥胖的早期阶段HIF-1α的高表达与白色脂肪组织的纤维化和胰岛素抵抗有关[5]。此外，HIF-1α在脂肪组织中特定表达导致褐色脂肪组织中能量的消耗和葡萄糖耐受能力的受损[6]。这些发现使关于HIF-1α与相关代谢疾病研究变得迫切需要。雌激素相关受体（estrogen-relatedreceptor，ERR）在调节葡萄糖、脂肪酸有氧氧化和线粒体能量代谢方面发挥作用。到目前为止，人们发现ERR有三个家族成员，分别是ERRα、ERRβ和ERRγ，它们主要存在于像骨骼肌、心肌、肾脏等这样高能量需求且富含线粒体的组织[7]，其中ERRα和ERRγ与骨骼肌内糖、脂的代谢和能量平衡关系密切。运动、HIF和ERR与机体能量代谢及相关代谢性疾病都有关系，但三者之间的具体关系和相互作用机制及其共同对能量代谢的调节目前并不十分清楚。有研究显示，ERRs可以与HIF结合并扩大低氧基因的表达；并且在低氧应答中，ERRs蛋白可以被HIF调节基因募集并被调控。运动有利于促进ERRs的表达，满足机体能量需求[8]。然而，HIF和一次性耐力运动是否会对ERRs产生影响其调控的具体机制有待进一步研究。因此，了解不同时间一次性运动对HIF-1α转基因鼠骨骼肌ERRα/γ表达的影响，对确定HIF对ERRα/γ的影响及ERRα/γ在有氧运动中的能量代谢调节作用有十分重要的意义。本实验通过对阴性对照型小鼠、HIF-1α基因低表达小鼠以及HIF-1α基因高表达小鼠进行1小时和6小时一次性耐力运动，检测各组小鼠骨骼肌ERRα和论文随机验证编号：BT528541615430-1-ERRγ核蛋白及其靶基因mRNA的表达，探讨不同时间一次性耐力运动HIF-1α对ERRα和ERRγ核蛋白及其下游靶基因的影响，以进一步揭示HIF-1α与一次性耐力运动骨骼肌ERRα、ERRγ糖脂代谢调节的关系。2文献综述HIF-1概述HIF-1的分子学概述低氧诱导因子(HIF-1)是一种氧依赖性的转录调节因子，其广泛表达于多个器官和细胞器中，当机体处于低氧环境中，HIF-1可以做出重要的免疫应答反应。HIF-1可以与低氧反应元件（hypoxicresponseelement，HRE）结合，而低氧反应元件位于低氧反应基因(hypoxiaresponsivegenes，HRG)上，低氧应激基因作为下游基因，在两者的结合后开始转录，调节机体对低氧环境的应答活动。HIF-1是异二聚体，由HIF-1α亚基和HIF-1β亚基组成，其中HIF-1α的分子量为120KD，HIF-1β的分子量为91/93/94KD。HIF-1α亚基被称为功能性亚基，是HIF-1异二聚体所特有的受缺氧调控的亚基。在缺氧环境下，HIF-1α亚基可以被诱导产生并与HIF-1β亚基结合形成异二聚体，从而表现其活性。而HIF-1β被称为结构性亚基，是不受低氧环境的诱导产生，在常氧和缺氧状态下均均表达，不受周围环境中的氧浓度影响。因此，HIF-1的生理活性主要取决于功能性亚基HIF-