结直肠癌肿瘤干细胞分选及131i标记ac133 mab对荷瘤裸鼠模型的体内示踪研究-in vivo tracing study of colorectal cancer tumor stem cells sorting and 131 i labeled ac 133 mab on tumor-bearing nude mice model.docxVIP

目录前言1前言18结果·······························································································26第二部分40131I标记AC133mAb对结直肠癌肿瘤干细胞的示踪研究40摘要40绪言43材料和方法·························································································44结果·······························································································57讨论·······························································································72结论·······························································································77参考文献····························································································77全文总结81综述85参考文献92致谢95附录196附录297前言结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，其发病率居世界恶性肿瘤发病的第三位(1)。在我国，结直肠癌发病率仅次于肺癌、胃癌、肝癌位于第四位，且近年来结直肠癌发病率以每年4.2%的增速急速上升，大大高于世界平均水平的2%(2)。近几十年来，虽然对结直肠癌的研究取得了较大进展，新的肿瘤生物学理论、治疗技术及治疗药物不断涌现，但由于存在肿瘤的耐放、化疗，复发及转移，其死亡率仍居肿瘤死亡的第二位(1)，给国家、社会和家庭带来了很大的损失。近年来肿瘤干细胞概念的提出，为结直肠癌的的诊断和治疗提供了新思路，并逐渐成为肿瘤研究的新热点。肿瘤干细胞（cancerstemcells,CSCs），又称肿瘤起始细胞(tumorinitiatingcells,TSCs)，是肿瘤细胞中一小部分具有自我更新和分化潜能的细胞亚群(3)。肿瘤干细胞具有很强的成瘤性(4,5)，少量CSCs即可形成新的肿瘤，且与肿瘤的耐药(6,7)、复发及转移有关(8,9)。20世纪70年代，有学者发现白血病组织中少量的细胞就能形成新的集落，因此提出了白血病干细胞的概念。1997年，Bonnet(3)等从急性粒细胞白血病中分离出了具有克隆形成能力的肿瘤细胞，首次证实了血液肿瘤干细胞的存在。此后，在乳腺癌(10)、结直肠癌(4,5)、脑肿瘤(11)、前列腺癌(12)及胰腺癌(13)等多种实体肿瘤中也发现了肿瘤干细胞的存在。随着研究的深入，发现肿瘤干细胞与正常组织干细胞具有许多共性，具有自我更新和多向分化潜能；具有多种共同的分子标志；均具有Notch、Wnt、hedgehog信号通路。CSCs的自我更新和分化潜能使其不仅能维持自身的数量，而且能够扩增分化形成大量子代细胞，为肿瘤的发生和增长提供了条件。Ricci-Vitiani等(5)研究发现，262个CSCs可在免疫缺陷小鼠体内形成肿瘤。CSCs具有很强的抗放、化疗能力。Bao(14)等研究发现神经胶质瘤肿瘤干细胞在放疗后具有更强的存活能力，其射线诱导凋亡比例明显低于普通肿瘤细胞。这可能与CSCs高效的DNA损伤修复机制、高表达耐药性跨膜转运蛋白ABCG2、表达高侵袭性受体、CSCs多处于静止或缓慢分裂状态等特性有关。CSCs的干性及耐药性造成了手术后及放化疗后肿瘤的复发、转移。因此，针对CSCs的靶向显像和治疗，有可能成为根治肿瘤的新希望(15)。肿瘤干细胞的特性决定了其在肿瘤发生发展中的重要作用，大量临床实验(16-19)也证实肿瘤干细胞标志物的检测对肿瘤的诊断、预后评估具有重要价值。因此对肿瘤干细胞的识别，尤其是体内识别，将对肿瘤的诊断、放化疗疗效的评估及预后评价产生重要的影响。目前，对肿瘤干细胞的识别主要通过体外检测，包括以下三种方法：①体外培养法(20,21)：肿瘤干细胞在体外无血清培养条件下可形成致密肿瘤球，普通肿瘤细胞则不能；②功能法(22,23)：将肿瘤细胞与Hoechst33342孵育，肿瘤干细胞能排出染料而不被染色，通过流式法可分选出不着色的肿瘤干细胞，通过此种方法分选出的细胞又称侧群细胞（sidepopulation,SP）；③免疫学方法(4,5,24,25)：肿瘤干细胞表达特异性分子标