结直肠锯齿状病变中p16及mlh-1基因甲基化状态和蛋白表达的分析-analysis of methylation status and protein expression of p16 and mlh - 1 genes in colorectal serrated lesions.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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结直肠锯齿状病变中p16及mlh-1基因甲基化状态和蛋白表达的分析-analysis of methylation status and protein expression of p16 and mlh - 1 genes in colorectal serrated lesions.docx

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结直肠锯齿状病变中p16及mlh-1基因甲基化状态和蛋白表达的分析-analysis of methylation status and protein expression of p16 and mlh - 1 genes in colorectal serrated lesions

目录英文缩略词11前言92材料与方法122.1实验材料122.2实验方法152.3结果判定192.4统计方法203结果203.1锯齿状病变临床资料特征203.2锯齿状病变组织病理学观察及分类213.3p16和MLH-1基因标准曲线223.4p16基因启动子甲基化状态检测结果和测序223.5MLH-1基因启动子甲基化状态检测结果和测序243.6各组织p16基因蛋白表达状况263.7各组织MLH-1蛋白阳性表达状况273.8各组织p16基因甲基化与其蛋白表达的相关性283.9各组织MLH-1基因甲基化与其蛋白表达的相关性293.10各组织p16基因甲基化与年龄相关性分析303.11各组织MLH-1基因甲基化与其年龄相关性分析………….314讨论314.1结直肠锯齿状病变与锯齿状癌变通路中基因甲基化的研究314.2结直肠锯齿状病变中p16基因甲基化状态及蛋白表达的研究334.3结直肠锯齿状病变中MLH-1基因甲基化状态及蛋白表达的研究344.4p16基因和MLH-1基因甲基化及年龄相关性研究…………..365结论37参考文献38实验二5-氮杂-2-脱氧胞苷对人结直肠癌HT-29和LoVo细胞系中MLH-1、p16基因甲基化和基因表达的影响及意义42摘要42Abstract.441前言472材料与方法482.1细胞株来源482.2主要仪器设备482.3主要实验材料492.4实验方法和步骤513结果603.1经5-Aza-CdR干扰的HT-29和LoVo细胞前后的形态学变化………………………………………………………………………….603.2HT-29细胞株与LoVo细胞株生长曲线603.35-Aza-CdR对细胞HT-29和LoVo中MLH-1和p16基因甲基化的影响613.45-Aza-CdR对细胞HT-29和LoVo中MLH-1和p16基因mRNA表达的影响633.55-Aza-CdR对细胞HT-29和LoVo中MLH-1和p16基因蛋白表达的影响674讨论………………………………………………695结论………………………………………………70参考文献………………………………………………71附录………………………………………………74致谢………………………………………………75综述………………………………………………76英文缩略词表英文缩写SSA/P英文全称Sessileserratedadenoma/polyp中文全称广基锯齿状瘤/息肉TSAMVHPGCHPMPHPCRCMMRTAMSI-HTraditionalserratedadenomaMicrovesiculahyperplasticpolypsGobletcellrichyperplasticpolypsMucinpoorhyperplasticpolypsColorectalcancerMismatchrepairgeneTubularadenomaMicrosatelliteinstability-High传统锯齿状腺瘤微小泡状型增生性息肉杯状细胞型增生性息肉黏液缺乏型增生性息肉直肠癌错配修复基因管状腺瘤高微卫星不稳定DNMTsMSIDNAmethyltransferaseMicrosatelliteinstabilityDNA甲基化转移酶微卫星不稳定CIMPCpGislandmethylationCpG岛甲基化表型实验一结直肠锯齿状病变中p16及MLH-1基因甲基化状态与蛋白表达的研究摘要[背景与目的]新版WHO(2010)消化系统肿瘤分类中，将结直肠锯齿状病变定义为一种以上皮呈锯齿状结构为特点的病变，可分为增生性息肉(hyperplasticpolyps,HPs)、广基锯齿状腺瘤/息肉(sessileserratedadenoma/polyp,SSA/P)和传统锯齿状腺瘤(traditionalserratedadenoma,TSA)。HP为锯齿状病变中最常见的病变，约占80%～90%，根据组织学上的粘液类型分为微泡型HP（microvesicularhyperplasticpolyp,MVHP）、富于杯状细胞型HP（goblet-cellrichhyperplasticpolyp,GCHP）及黏液缺乏型HP（mucin-poortypepolyp,MPHP）。SSA/P占锯齿状病变的15%～25%，根据细胞异型性分为伴/不伴有细胞异型增生型。TSA占锯齿状病变的1%～6%左右，研究表明TSA具有恶变为结直肠癌的潜能，但它的锯齿状癌变通路存在争议。锯齿状病变是继经典型腺瘤后最重要的结直肠癌(colorectalcancer,CRC)癌前病变类型，具有发展为CRC的恶性潜能。近年来新认识到它与部分散发性结直肠癌的发生紧密相关，被认为是CRC除“腺瘤-癌变”途径和“de