结扎血管及淋巴管对walker-256细胞荷瘤淋巴结转移的影响-effects of ligation of blood vessels and lymphatic vessels on lymph node metastasis of walker - 256 cells bearing tumor.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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结扎血管及淋巴管对walker-256细胞荷瘤淋巴结转移的影响-effects of ligation of blood vessels and lymphatic vessels on lymph node metastasis of walker - 256 cells bearing tumor

本课题受湖南省教育厅项目《淋巴结内肿瘤细胞转移方式的实验研究》（09C841）资助。1缩略词英文全称中文全称MVDmicrovesseldensity微血管密度MLVDmicrolymphaticvesseldensity微淋巴管密度HEVhighendothelialvenule高内皮小静脉Walker256Walker256乳腺癌HEhematoxylinandeosin苏木精-伊红CD31Anti-CD31，Platelet/endothelialcelladhesionmolecule（PECAM-1）血小板内皮细胞黏附分子-1抗体D2-40lymphaticvesselendothelial氧连接型唾液酸糖蛋白,淋巴管内皮特异标记PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液SPstreptavidin-perosidas链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法SMskipmetastasis跳跃性转移VEGFVascularEndothelialcellGrowthFactor血管内皮细胞生长因子2结扎血管及淋巴管对Walker-256细胞荷瘤淋巴结转移的影响研究生：冯程导师：禹正杨副教授中文摘要目的：（1）从组织结构上描述近端Walker-256细胞荷瘤的腘窝淋巴结血管新生、淋巴管新生情况；（2）观察结扎血管及淋巴管对大鼠Walker-256细胞荷瘤腘窝淋巴结中血管/淋巴管新生的影响，探讨其在进展及转移中的可能作用；（3）进一步探讨淋巴结内癌细胞转移方式，恶性肿瘤淋巴结跳跃转移可能机制。方法：1.从南华大学实验动物部提取70只200g成年SD大鼠双侧足底注射Walker-256乳腺癌细胞建立移植瘤及荷瘤腘窝淋巴结转移模型，取6只制模成功大鼠进行淋巴结移植实验。剩余64只大鼠随机分成4组：结扎淋巴管组、结扎血管组、结扎淋巴管/血管组以及对照组。各组手术干预前测量各个腘窝淋巴结大小（统计分析有无统计学差异）。2.分别于术后的第3天、第7、第14天及21天检测：①观察大体观：淋巴结大小、体积变化；②病理HE观察结构改变情况，检测癌栓率；③选择各组干预后的转移淋巴结进行CD31与D2-40免疫组化染色，检测计数新生血管密度（MVD）及新生淋巴管密度（MLVD）改变情况。结果：（1）予以结扎干预后各时间点淋巴结体积大小较对照组缩小（P＜0.05）；各组间比较，全部结扎较单纯结扎淋巴管组或血管组缩小明显（P＜0.05）。（2）大鼠Walker-256乳腺癌细胞腘窝淋巴结转移率为96.09%，证实制模成功率高。3（3）HE染色：各组转移淋巴结结构破坏，移植淋巴结7天时萎缩明显，可见部分结果坏死；结扎干预组血管或淋巴管管内发现了癌栓，总癌栓率为24.22%（31/128），其中结扎血管组癌栓率为15.62%（5/24），结扎淋巴管组癌栓率为21.87%（7/24），全部结扎组癌栓率为6.26%（2/24），对照组癌栓率为53.13%（17/24）例，各组间比较有统计学差异（P＜0.05）。（4）予以结扎干预后，3天、7天、14天、21天时间点的CD31及7天、14天、21天时间点的D2-40结果显示：结扎淋巴管组、结扎血管组以及全部结扎组的MVD值及MLVD值均低于对照组(P＜0.05)。组内比较，各组MVD、MLVD随时间延长表达下降（P＜0.05）。结扎血管组MVD较结扎淋巴管组下降明显（P＜0.05），结扎淋巴管组MLVD较结扎血管组下降明显（P＜0.05）。结论：（1）大鼠Walker-256细胞腘窝淋巴结转移模型为理想研究淋巴转移模型。（2）结扎血管及淋巴管可抑制大鼠Walker-256细胞荷瘤淋巴结血管/淋巴管新生。（3）结扎干预大鼠Walker-256细胞荷瘤淋巴结可减少淋巴结内癌栓率。关键词：血运转移淋巴道转移淋巴管新生血管新生跳跃转移远处转移4TheeffectsofligationinterventionbloodandlymphaticvesselsoftheratWalker-256cell-burdenedlymphnodesAbstractObjective:（1）HistologicallycharacterizeangiogenesisandlymphangiogenesisinmetastasticregionalLNsproximaltotumors.（2）WeobservetheMorphologyanddistributiontraitsofangiogenesisMVDandlymphangiogenesisMLVDintheratpoplitealfossaofWalker256cellmetastaticlymphnodesaftertheligationinterve