可降解抗凝共混膜制备、优化及生物相容性评价-preparation, optimization and biocompatibility evaluation of degradable anticoagulation blend membrane.docxVIP

缩略语CT(chitin)甲壳素CTS(chitosan)壳聚糖CMCTS(carboxymethylchitosan)羧甲基壳聚糖HECTS(hydroxyethylchitisan)羟乙基壳聚糖HUVEC(humanumbilicalveinendothelialcells)人脐静脉血管内皮细胞ECM(extracellularmatrix)细胞外基质PLA(polylacticacid)聚乳酸PGA(polyglycolicacid）聚羟基乙酸MTT(methylthiazolyltetrazolium)四甲基偶氮唑盐DMSO(dimethylsupheoxide)二甲亚砜ePTFE(expandedpolytetrafluoroethylene)膨体聚四氟乙烯CS(chondroitinsulfate)硫酸软骨素RGR(relativegrowthrate)相对增值率APP(3-aminopropylphosphonicacid)3-氨丙基膦酸可降解抗凝共混膜的制备、优化及生物相容性评价摘要目的：动脉硬化、血管瘤等血管疾病严重危害着人类的健康，在药物治疗效果不佳的情况下，用自身的正常血管替换病变血管是一种好的治疗方案。但是自体血管来源有限，所以制备出与自体血管相近的组织工程血管有重大意义。三维材料支架是组织工程血管的必要组成部分，它需具备良好的降解性、生物相容性、力学性能和抗血栓性等。可降解天然生物材料如明胶、壳聚糖、硫酸软骨素、肝素等均具有良好的生物相容性，常用于三维支架的构建。其中肝素是效果非常好的抗凝剂，它与材料复合使用可提高材料的血液相容性。因此，本研究的思路是从几种可降解天然生物材料中，经过筛选，制成生物膜，并优化膜的制作方法，使该膜具有良好的降解性和生物相容性，并有一定的抗凝作用和力学性能。方法：（1）通过MTT法评价CMCTS、HECTS、CS、肝素和明胶对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）形态和增殖的影响，并结合各材料的性质，选出用于制作膜片的原料；（2）将原料混合交联铺膜，对不同材料比例和交联度的膜片进行评价，从而确定膜片的最佳材料比例和最佳交联度，评价指标包括膜片的外观、吸水率、溶胀比、拉伸强度、断裂伸长率、肝素缓释能力和抗血栓能力；（3）评价最优组膜片的生物相容性，即膜片的溶血率、细胞毒性和急性全身毒性，膜与HUVEC的细胞相容性，在大鼠皮下和肌肉中的降解情况和组织相容性。结果：（1）CMCTS、HECTS、CS、肝素和明胶在0mg·L-1～2000mg·L-1的浓度范围内对HUVEC的增殖没有抑制作用，对细胞形态没有影响；（2）优化后的膜片表面光滑，柔韧性良好，吸水率为237.39%，溶胀比为446.15%，拉伸强度为0.24MPa，断裂伸长率为39.07%，膜片上的肝素在24h内逐渐释放，膜片具有良好的抗血栓能力。（3）膜片的溶血率小于5%，细胞毒性为0级，对小鼠无明显的急性毒性，细胞相容性良好，HUVEC在膜片表面生长良好，在大鼠体内15周左右能完全降解，组织相容性良好。结论：在本研究中制备出一种可降解抗凝共混膜，该膜片制作方法简单，有良好的柔韧性、降解性和生物相容性，有一定力学性能和抗凝、抗血栓能力。关键词：可降解；抗凝；膜片；生物相容性Thepreparation,optimizationandbiocompatibilityevalutionofbiodegradableandanticoagulantblendmembraneAbstractObjective:Manykindofvasculardiseasesdoharmtothehealthofhumanbeings,forexamplearteriosclerosisandhemangiomas.Inthecaseofdrugtherapynothavingobviouseffect,itisagoodwaytotreatofreplacingthediseasedvesselswithautologousbloodvessels.However,thereislimitedsuitableautologousbloodvesselstouse.Itissignificanttopreparethetissueengineeringbloodvesselstoreplacethelesionsegment.Anecessarypartofthetissueengineeringbloodvesselsismaterialscaffoldwhichmusthavegooddegradability,biocompatibility,mechanicalproperties,andantithromboticadhesion.Na