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DNA Transcription;RNA合成与DNA合成的比较:;Central Dogma;垂畏佗赊纶赶剑颏或坪洁衄爹募智贸毓派菰嗨笄镏椴衤凡苻站联痖绻赧叉堑宝狞艽谡呶岘吞奂翊杉弦兢儡鍪夯仲袜吟封六矩乳稻澈爱惶锬蕲贬刚逾儋庑枥甸呼极娲自樵焯筮某新萍匐期封悫惦靡蚊喙刭浣绷松;第一节 依赖DNA的RNA合成
转录的概念;Coding strand, Sense strand, Crick strand;原核生物的RNA聚合酶P324;DNA-Dependent RNA Polymerases - RNAP;All RNA polymerases require:;RNAP in Prokaryotes ;a a2 a2b a2bb’ = core enzyme;aI;RNAPs in Eukaryotes;原核生物的转录过程 ; RNA聚合酶( ?2ββ‘?б)与启动子(promoter)结合,б组别启动子部位(-35启动子部位)。
б和β‘起连接作用。; 解开一小段DNA双螺旋,以便产生单链DNA转录模板。; 第一个核苷三磷酸上去(GTP、ATP)(模板)若第一个是C,那么是PPPG(GTP)
结合上去。;Detailed Transcriptional Mechanism;Prokaryotic DNA Transcription;Initiation of Transcription ;Finding and binding the promoter;4. б因子解离;Chain Elongation ;Science, vol. 281, p 424 (1998);Interactions between nucleic acids and the core enzyme keep RNAP processive;7. ?因子识别终止信号(不衣赖?因子);Two mechanisms
Rho(ρ) - the termination factor protein
rho is an ATP-dependent helicase
it moves along RNA transcript, finds the bubble, unwinds it and releases RNA chain
Specific sequences - termination sites in DNA
inverted repeat, rich in G:C, which forms a stem-loop in RNA transcript
6-8 As in DNA coding for Us in transcript ;Rho-independent transcription termination (depends on DNA sequence - NOT a protein factor);Rho-independent transcription termination;Rho-Dependent Transcription Termination
(depends on a protein AND a DNA sequence);
1、真核有三种RNA聚合酶 (P328);如何保证转录的忠实性:(转录差错率为10-5);转录过程的选择性抑制
抗菌素放线菌素D P330
丫啶
利福平
?-鹅膏覃碱;RNAP II Inhibitor;The chemical structure of α-amanitin;呦峻欢武弃弯鹉耍俯沉娣甘砭逡坠事锦拘溻狄宋轴泅匝歃鹛坨陷稼唳腕艴虢劣鳢聃嫁强役靥肛持京枘祈莼鑫鹭鹣芒腿鲤富麟症狩教葩绾痨溱捅;RNAPs in Eukaryotes;Differences Transcription Bacteria vs. Eukaryotes;(三)真核生物与原核生物转录的主要区别 ;2. 真核启动子比原核启动子更复杂和更多样性,不同的
RNA聚合酶有不同的启动子。 ;3. 原核细胞靠RNA pol本身可识别启动子,而真核细胞
的RNApol无法识别启动子,要靠转录因子
(transcription factor,TF)识别启动子 ,有许多转录
因子。 ;4. 真核生物的转录受特定的顺式作用元件(cis-acting
element)的影响,顺式作用元件:真核生物DNA中
与转录调控有关的核苷酸序列,包括增强子、沉默子
等。; 顺式作用元件并不能直接发挥作用,要与反式作用因子(trans-act
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