免疫组化化学-杭州鹰旸生物科技有限公司.PDF

免疫组化化学 1 实验目的 免疫组织化学检测小肠组织中iNOS、eNOS、nNOS、PKG 的表达量。 2 材料与仪器 2.1 实验材料 动物，来源，生产许可证和使用许可证。 表2.1.1.1 主要试剂 试剂名称 厂家（货号） Anti-iNOS antibody Abcam （ab15323 ），美国 Anti-eNOS antibody Abcam （ab15323 ），美国 Anti-nNOS antibody Abcam （ab15323 ），美国 Anti-PKG antibody Abcam （ab15323 ），美国 石蜡 上海国药集团（XXXX ） 甲醛 上海国药集团（XXXX ） 二甲苯 上海国药集团（XXXX ） 无水乙醇 上海国药集团（XXXX ） H O 上海国药集团（XXXX ） 2 2 广谱二抗 上海长岛生物技术有限公司（XXXX ） DAB 浓缩型试剂盒 上海长岛生物技术有限公司（XXXX ） 苏木素 BASO （XXXX ） 中性树脂 上海长岛生物技术有限公司（XXXX ） 2.2 实验仪器 2.1.2.1 主要仪器 仪器名称 厂家（型号） 正置显微镜 OLYMPUS 公司（XXXX ），日本 移液器 吉尔森P 型移液器公司（XXXX ），中国 恒温烘箱 上海恒一科学仪器有限公司（XXXX ），中国 石蜡切片机 徕克公司（XXXX ），中国 摊片机 徕克公司（XXXX ），中国 数码相机 NIKON 公司（XXXX ）日本 3 实验方法 3.1 实验分组 1) 对照组 2) 腹腔感染对照组 3) 腹腔感染生理热卡组 地址：浙江省杭州市滨江区滨安路688 号天和高科园2 幢E 楼240 室 4) 腹腔感染低热卡组 3.2 腹腔感染动物模型建立 实验前禁食24 h 后用3%戊巴比妥钠，按每kg 体重1 mL 由耳缘静脉缓慢注入麻醉。 腹部剃毛，常规消毒，在无菌操作下由中下腹正中剖腹长约5 cm，找出阑尾后在距阑尾游 离末端约5 cm 处，用4 号丝线结扎阑尾并保留结扎段阑尾血供，在其末端用打孔器戳孔4 个直径约0.15 cm，查无渗血后放回腹腔原位,分两层缝合腹壁切口。术后自由进食水。 3.3 胃造瘘手术 全麻备皮，家兔仰卧位，碘消毒腹部手术区1 遍，酒精3 遍，铺巾展单。剑突下1~1.5 cm 处沿腹白线剪开至耻骨联合上方2~3 cm ，依次剪开皮肤、皮下组织、腹直肌、腹膜， 严格结扎止血。 进入腹腔后选择幽门切迹以左及大、小弯之间的胃前壁作为造瘘口位置。用 4 号丝线 做2 层同心荷包缝合，最内层直径为 1.5cm，内外层间距约1cm。在荷包缝合