不同体重和不同盐度条件下仿刺参(apostichopus japonicus)免疫活性的分析-analysis of immune activity of apostichopus japonicus in different body weight and salinity conditions.docxVIP

不同体重和不同盐度条件下仿刺参（Apostichopusjaponicus）免疫活性的研究 摘要仿刺参（Apostichopus japonicus）属于棘皮动物门海参纲，是一种具有很高 营养价值和药用价值的海参，几百年来一直被视为一种名贵的海味，有“海中人 参”的美誉，是我国北方重要的经济养殖品种。然而，随着养殖规模的扩大，病 害问题也日益突出。寻找合适的方法提高仿刺参自身的抗病力，已成为急需要解 决的问题。然而，目前对于仿刺参免疫机制仍不清楚，没有一套科学的仿刺参免 疫指标评价体系的现状也给这个问题的解决增加了困难。本论文以仿刺参为对象，分别以体重和盐度为单因素，研究了其不同阶段的 免疫活性和应激反应中各个免疫组分的变化，以期为阐明仿刺参的免疫机制及建 立适合的免疫指标提供基础的实验依据。本文主要有以下三个方面内容：㈠仿刺参体腔细胞的分类采用瑞士-姬娒萨混合染色法和活细胞涂片法观察了仿刺参体腔细胞的形态 特征，并将体腔细胞分为了：淋巴样细胞、颗粒细胞、变形细胞、透明细胞、结 晶细胞和纺锤细胞六大类。㈡不同体重仿刺参免疫活性的研究以体重为单因素，选取了 50g、100g 和 150g 左右的仿刺参，对其体腔细胞 数量、各类群细胞比例、吞噬活性、呼吸爆发活性、抗菌活力、溶菌活力、凝血 活性、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和酚氧化酶（PO）等进行 了研究。结果显示：体腔细胞数量及各细胞类群比例、蛋白浓度、凝血活性、SOD 和 POD 活性在不同体重仿刺参中存在较大差异，而呼吸爆发活性、抗菌活力和 溶菌活力差异不显著。体腔细胞数量、蛋白浓度、SOD 活性以及淋巴样细胞、 颗粒细胞和变形细胞比例在体重 150g 组最高，透明细胞比例和 POD 活性在 150g 组最低，而 100g 组中淋巴样细胞和变形细胞比例及凝血活性最低，说明了不同 体重仿刺参的免疫活性存在明显差异，也表明在不同生长阶段仿刺参免疫系统中 起主要作用的免疫组分不同。本实验中几乎检测不到 PO 活性，说明其在体腔液中含量很低，对于它的研究需要更为精密的检测手段。㈢研究了盐度变化对仿刺参免疫活性的影响 以盐度为单因素，通过改变海水盐度研究了仿刺参在应急状态下免疫组分的变化。实验组将盐度从 30 提高到 40，然后经过 35 恢复到 30，并在各个盐度点 进行免疫活性测定。结果表明：盐度变化对仿刺参体腔细胞数量、各类群细胞比 例、呼吸爆发活性、溶菌活力、抗菌活力和过氧化物酶（POD）浓度具有显著性 影响；而对超氧化物歧化酶（SOD）、凝血活性和吞噬活性影响不显著。在盐度 变化中，体腔细胞数量随盐度升高而升高，但各组间差异不显著；而各类群细胞 比例变化明显，盐度升高时大淋巴样细胞、变形细胞和透明细胞比例迅速降低， 而颗粒细胞和小淋巴样细胞比例明显上升，后各细胞比例随盐度下降逐渐恢复接 近初始水平；呼吸爆发活性在盐度升到 40 时，显著增强（P0.05），然后随盐度 逐渐降低；溶菌活力在盐度变化中虽呈先降低后升高的趋势，但在盐度恢复到 30 后，溶菌活力大大增强（P0.05）；抗菌活力在盐度升高时迅速降低（P0.05）， 而后缓慢升高；POD 浓度在盐度变化中迅速降低后逐渐上升，但恢复到 30 时浓 度仍较低（P0.05）。研究表明，在盐度刺激下，呼吸爆发和抗菌活力变化灵敏， 可作为仿刺参盐度响应的主要免疫指标。而各免疫组分的变化，也说明了盐度升 高、仿刺参处于不利环境中，影响了其部分免疫力，使得抗病力下降，易遭受病 害。综合体重和盐度的研究，作者认为呼吸爆发、抗菌活力不仅在生长中表现稳 定，而且盐度应激中表现灵敏，应为仿刺参免疫指标的必要内容。而体腔细胞数 量、各类群比例、溶菌活力、POD 也具有较灵敏的变化，也可作为免疫指标的 基本内容。关键词：仿刺参；体重；盐度；免疫活性Study on immune activity of sea cucumber(Apostichopusjaponicus）in different weight and salinity AbstractApostichopus japonicus, also known as Sea cucumber, belongs to Echinodermata, Holothuroidea. Because of high nutritional, it has been regarded as valuable seafood, and got ‘sea ginseng’ reputation. Moreover, it is also an economically important aquaculture species in the north of China. Howeve