肝康复合剂的化学成分及药理活性分析-chemical constituents and pharmacological activity analysis of gankangfu mixture.docxVIP

摘要肝康复合剂是以火炭母、大青、盘上芫茜不同比例配成的中药，是海南岛民间常用药，对治疗黄疸型肝炎有很好的疗效。火炭母为蓼科蓼属植物火炭母草(PolygonumchinenseL.)、大青（ClerodendroncyrtophyllumTurcz）为马鞭草科大青属植物、盘上芫茜（Herbahydrocotyles）为伞形科天胡荽属植物。本课题研究该复方有效部位的化学成分，阐明其药效物质基础。目前未见对该复方的药理活性成分进行报道，因此，为了更好地发挥这一独特优势，本课题将深入研究该复方的化学成分和药理活性，为以后开发和利用该复方提供理论依据。取一定比例干燥的火炭母，大青，盘上芫茜配成的复方中药粉末(10kg),用75%乙醇浸泡，回流提取浓缩后得到浸膏，进行部位分离，利用大孔吸附树脂法、硅胶柱色谱法、葡聚糖凝胶柱色谱法和重结晶法对氯仿和水相部位进行分离纯化,用NMR、MS等波谱方法结合物质的理化性质对各单体化合物进行结构鉴定。并对各极性部位进行了退黄保肝活性测试。采用ANIT灌胃给药建立小鼠实验性黄疸模型，以小鼠血清总胆红素（TBIL）和谷丙转氨酶（ALT）含量为指标，并以茵栀黄颗粒为阳性对照，观察75%乙醇提取物及不同极性提取部位（石油醚提取物、氯仿提取物和水提取物）对小鼠血清TBIL和ALT的影响，评价其退黄保肝作用。从复方中药粉末中分离并根据理化常数和光谱数据(1H-NMR、13C-NMR)及文献对照法鉴定出23个化合物的结构，分别为：β-谷甾醇(1)，棕榈酸(2)，3,4-二甲氧基苯乙醚(3)，薯蓣皂苷元(4)，桦木酸(5)，乌索酸(6)，豆甾-4-烯-3-酮(7)，crotafuranB(8)，4-二甲氨基苯甲醛(9)，染料木素(10)，tetrahydropalmatine(11)，香草醛(12)，2-叔丁基-4-羟基茴香醚(13)，香草酸(14)，大黄素(15)，leptosphaepin(16)，4′-dihydrophaseicacid(17)，天麻素(18)，4-caffeoylquinicacid(19)，熊果苷(20)，(Z)-resveratrol(3,5,4-trihy-droxystilbene)-3-O-β-glucoside(21)，甘露醇(22)，β-胡萝卜苷(23)。除化合物(1)、(4)、(6)、(10)、(12)、(14)、(22)、(23)外，其余化合物均是首次从这三种植物中分离得到。药理结果表明，复方粗提取物浓度为5g/kg以及氯仿部位浓度为1g/kg时对ANIT造成的小鼠实验性黄疸具有显著降低血清TBIL和ALT的作用（P﹤0.01），粗提取物中低剂量组、氯仿部位中低剂量组、石油醚部位及水相部位各剂量组小鼠血清TBIL和ALT含量虽较模型组有所降低，但差异无统计学意义（P﹥0.05）。此结果表明该方对治疗急性黄疸型肝炎有较显著的效果。关键词：肝康复合剂；火炭母；大青；盘上芫茜；化学成分；急性黄疸型肝炎AbstractGankangFormula,apulvisofHainanislandfolkmedicinecomplex,consistsofthreekindsofChinesemedicinesuchasPolygonumchinenseL.,ClerodendroncyrtophyllumTurczandHerbahydrocotylesandhasagoodeffectontreatmentoficterichepatitispatients.Toourknowledge,thechemicalconstitutesandpharmacologicalactivitiesofthefolkmedicinecomplexhaveneverbeenreportedpreviously.Inordertotakecomprehensiveutilization,itisveryusefulforstudiesonchemicalconstituentsandpharmacologicalactivitiesofthefolkmedicinecomplex.23compoundswereisolatedfromchloroformfractionandidentifiedas:β-sitosterol(1),palmiticacid(2),3,4-dimethoxyphenyl-ethyl-ether(3),diosgenin(4),betulinicacid(5),ursolicacid(6),stigmast-4-ene-3-one(7),crotafuranB(8),4-dimethylamino-benzaldehyde(9),genistein(10),tetrahyd