植物组织培养课件第5篇 章植物器官和组织培养.pptVIP

第五章 植物器官和组织培养 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 1.植物器官培养 1. 营养器官的培养 离体根（Root）培养 离体茎（Stem）培养 离体叶（Foliage）培养 2. 生殖器官的培养 花（Flower）培养 种子（Seed）培养 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 植物器官培养的概念与意义 植物器官培养(Plant organ culture)主要指植物根、叶、茎、花及小果实等器官在离体条件下的无菌培养。 特点：能保持器官所具有的特征性结构。 在组织培养研究中，常以器官作为外植体，研究较广泛，在应用上也卓有成效。 通过器官培养可以快速大量地繁殖，目前这一技术已在生产上得到广泛应用。 本章将介绍离体根的培养、茎的培养和叶的培养。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 1.1根的培养 优点：培养离体根具有生长迅速、代谢活跃及在已知条件下培养可根据需要增减培养基中的成分。 多用于探索植物根系的生理及其代谢活动。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 番茄根的培养过程 番茄种子经常规表面消毒法消毒 放置在盛有MS培养基的培养瓶中萌发。 待胚根伸长至一定长度后，从根尖一端切取10mm长接种于固体培养基中 暗条件下培养4天至有侧根发生 7天后可以切下侧根的根尖作为新的培养材料再进行扩大培养 通过这种由单个直根衍生而来，并经继代培养而保持遗传性一致的根的培养物，可称为离体根的无性系。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 1.3叶的培养 很多植物如非洲紫罗兰、香叶、天竺葵、秋海棠等的叶片具有很强的再生能力。 由于取材方便，数量多且均一性较强，可以作为适宜的外植体。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 培养过程 叶片摘取后用水冲洗数小时至干净； 表面消毒，一般先用70％乙醇浸泡30秒，然后用0.1％HgCl2溶液浸泡数分钟。 平放在固体培养基上培养。 先形成愈伤组织，然后再分化出胚状体、茎、叶和根。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 2.植物组织培养 茎 尖 培 养 2.1植物分生组织培养 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 2.1.1植物病毒的危害 植物病毒已超过500种，在果树、蔬菜、花卉、林木以及农作物上皆有发现，严重危害生产。 侵染菊花的病毒和类病毒有19种之多，如：无子病毒(CAV)、轻斑驳病毒(CMMV)、矮化病毒(CSV)等；侵染康乃馨的病毒有11种之多，如：斑驳病毒(CaMV)、食环病毒(CERV)、环斑病毒(CRV)等。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 1886年，德国农业化学家 迈尔在荷兰 的接种试验 (烟草花叶病是一种传染性疾病) 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 被病毒感染的植物 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 2.1.2植物病毒的特性及其侵染 大多植物病毒不经种子传播，因此可从轻度染病植株上采集种子，不会将病毒传至下一代。 但是专化性强的病毒除外，如豆类病毒可随着种子传播。 对于有性生殖退化，仅能用无性繁殖方法繁殖的植物，一旦染病则毫无办法。 人们认识到利用茎尖培养可以脱除病毒，并大幅度地提高作物(植物)产量和品质。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 2.1.3 植物脱毒的原理及方法 茎尖培养脱毒法； 热处理脱毒法； 微体嫁接离体培养脱毒法； 珠心组织脱毒法。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 茎尖培养脱毒法 茎尖培养脱除病毒的依据：病毒在植物体内分布是不均一的，越接近生长点，病毒浓度越稀，因此有可能采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。 茎尖培养脱毒分子机理：已知病毒是DNA大分子，病毒侵染植物后可进入植物细胞。当植物细胞分裂时，病毒DNA随着复制。因此，植物细胞分裂和病毒繁殖之间存在相互竞争，在迅速分裂的植物细胞中，是正常核蛋白合成占优势，而在植物细胞伸长期间，是病毒核蛋白合成占优势。生长点、分生组织细胞是活跃分裂的细胞。其分裂速度比病毒DNA复制速度快，故采用旺盛分裂的生长锥(顶端分生组织)离体培养，就有可能脱除植物病毒。 中南林业科技大学经济林育种与栽培重点实验室 热处理脱毒法 利用茎尖培养方法脱除植物病毒，对多数植物是可行的。 但需切取0.2-0.5mm的小茎尖培养，不仅需高超的剥离技术，同时对培养基的营养组成，渗透压等要求也很高。 再者，茎尖培养周期长，因植物品种而异一般需0.5-2年。 为了克服茎尖培养脱毒法带来的弊病，提高脱毒效率，故创造了热处理脱毒法。