一植物细胞全能性.ppt

二、导管细胞分化的分子调控 特异性基因表达与百日草导管细胞分化有关。Fukuda和Komamine(1983)报道，在百日草叶肉导管细胞分化的诱导下，培养48h内观察到叶肉细胞形态建成变化之前，有两种蛋白质的合成消失，出现两种新的多肽。新合成的蛋白质就是导管分化的生物化学标记。 第31页/共43页 三、培养基成分对维管束分化的影响 影响维管束组织分化的因子有植物激素、蔗糖等。在洋丁香愈伤组织中，低浓度的生长素能够刺激木质部的发生，高浓度生长素抑制木质部的形成，生长素浓度和木质部浓度和木质部分化程度之间存在着一种反比关系。细胞分裂素对一些植物木质部发生具有一定的促进作用。在适当的生长素浓度下，把蔗糖水平提高到2%，则有利木质部的形成，但韧皮部却很少形成甚至不形成。在蔗糖浓度为2.5-3.5%时，木质部和韧皮部都能分化，为4%时，所形成的维管组织只是韧皮部，很少或没有木质部。 第32页/共43页 形态发生的诱导过程示意 诱导信号 感受态细胞 细胞的决定 单极性 双极性 根或芽原基 胚性细胞团 体细胞胚胎 不定芽 不定根 第33页/共43页 本次课应掌握的知识点： 一、名词解释 再分化 二、问答题 掌握再分化的种类和影响因素？ 第34页/共43页 1.愈伤组织的驯化 第一章 植物细胞的全能性 第四节 细胞全能性在细胞培养过程中的变化 2、驯化愈伤组织的最大特点 3.培养物形态发生潜力的丧失假说 第35页/共43页 培养条件促使体细胞形态发生，而由于植物细胞和愈伤 组织遗传物质或生理状态在培养过程中发生变化，会导 致形态发生异常，甚至失去形态发生能力，细胞全能性 衰退和消失。常见的细胞形态发生异常的类型有以下几 种。 第四节 细胞全能性在细胞培养过程中的变化 一、愈伤组织的驯化 愈伤组织驯化：指原先依赖某种生长调节物质而生长的培养物变为对该物质自养型的培养物。 第36页/共43页 一、愈伤组织的驯化 如通常需加入外源生长调节物质以维持愈伤组织继续生长。经过 一段时间继代培养后，愈伤组织对对外源生长调节物质的依赖性 消失，自身能够合成植物激素，既由异养型变为自养型。目前发 现主要是CK和生长素的驯化，这样现象已于许多植物的培养物中 发现，如胡萝卜、马铃薯、烟草、甜菜、和欧芹等。通常已驯化 程度来判断愈伤组织的驯化。驯化程度为在无激素培养基上愈伤 组织相对生长速率与含激素的培养基上的愈伤组织的相对生长速 率之比。当驯化程度0.4时，为驯化愈伤组织。驯化作用因外植 体不同而有程度上的差异。实验表明，越靠近茎尖的外植体其愈 伤组织驯化程度越高，这与外植体中分生细胞的分布以及它在培 养时形成芽的能力有关。 第37页/共43页 一、愈伤组织的驯化 驯化愈伤组织的最大特点：是无形态发生能力。甜菜生长素驯化的细胞分裂素自养型细胞高度分生组织化，无器官分化。由于该细胞缺乏纤维素和木质素的合成能力，因此难于进行细胞壁的增厚。甜橙猪心愈伤组织成为驯化愈伤组织后，即使培养集中的微量IAA（0.001mg/L）也抑制体细胞胚胎发生。驯化愈伤组织胚胎发生潜力丧失，是因为内源生长素水平所致。植物内源激素升高的一个途径是由于土壤根癌农杆菌介导的Ti质粒转移到植物细胞中，把T_DNA整合到植物细胞核基因中。转化细胞的内源生长素和细胞分裂素水平高，能在无植物激素的培养基上分裂生长。但很少有器官发生。 第38页/共43页 一、愈伤组织的驯化 第39页/共43页 二、驯化愈伤组织的最大特点 随着继代培养次数增加，植物培养物形态发生潜力下降或消失，甚至细胞分裂和生长减缓直到停止。MOlle等（1993）指出胡萝卜胚性培养物随着培养时间的增加，胚胎发生质量下降，逐渐地失去胚胎发生的潜力。4-6月后，胚胎发生潜力几乎完全消失。 第40页/共43页 遗传假说，由于培养物细胞核倍性变化，出现非整 倍体，染色体结构变化和基因编译等因素引起形态 发生潜力丧失； 生理假说，认为细胞内源激素水平和平衡变化是形 态发生潜力丧失的因子； 竞争假说，愈伤组织或培养细胞中不同形态发生潜力 的细胞类型具有相互代替生长的特性，随着继代次数 增加，非形态发生潜力的细胞取代有形态发生能力潜 力的细胞后，培养物表现没有形态发生的能力。 三、培养物形态发生潜力的丧失假说 第41页/共43页 本次课应掌握的知识点： 一、名词解释 愈伤组织驯化 二、问答题 掌握植物愈伤组织内源激素增加的原因？ 培养物形态发生潜力的丧失假说？ 第42页/共43页 第43页/共43页 1.细胞全能性及其类型 第一章 植物细胞的全能性 第一节 植物细胞脱分化与感受态细胞的发生 2.细胞周期与脱分化及其产生条件