蛋白质与光谱探针的作用及其分析应用研讨.pdfVIP

摘要 蛋白质光谱探针是20世纪50年代发展起来的测定蛋白质的分析方法。借助于蛋白质 光谱探针可以测定微量的蛋白质，并可以研究蛋白质结构与功能的关系，研究蛋白质与小 分子配体的作用机理。它的主要特点是：操作方法较为简便；灵敏度高；线性范围宽；干 扰物质少；应用范围广等，具有广阔的发展前景。基于蛋白质定量分析的研究现状及本实 验室的研究基础，本文做了以下几个方面的工作： 1．概述了蛋白质化学基础，综述了蛋白质定量分析的一些主要方法及其在生物化学、药 学、食品和临床医学等方面的应用，引用文献126篇。 2．寻找新的性能优良的光谱探针 光系数为3．05×105 且这两种方法简单，稳定，线性范围宽，对比度大，灵敏度高，能应用于人血清中总蛋白 质的测定，因此，建立了以变色酸2c和偶氮胂羧为光谱探针光度法测定人血清蛋白质的 新方法。 IⅡ络合 (2)金属络合物光谱探针：研究表明，在pH2．O～2．4的酸性介质中，Cu(II)．AA 物与蛋白质发生作用，生成三元分子复合物。线性范围为O一120m叽，表观摩尔吸光系数 质发生作用，导致络合物溶液褪色，线性范围为O～80rr吼，表观摩尔吸光系数e 与蛋白质作用，其吸收光谱发生大幅度变化，生成的深红色三元复合物，k。为538nm， 比试剂本身红移“8衄，比络合物k。红移30锄。线性范围为啦300mg／L，表观摩尔吸 光系数8 为光谱探针的光度法高，且生物体内常见无机离子及有机物质基本不干扰测定，直接应用 于人血清中蛋白质总量的测定，结果满意，因此建立了以络合物为光谱探针分光光度法测 定蛋白质含量的新方法。 3．深入开展蛋白质与染料探针(小分子有机配体)相互作用理论研究 研究了铀试剂III与人血清白蛋白反应前后的吸收光谱，并对其反应机理和结合平衡进 行了深入探讨。深入开展蛋白质与染料探针(小分子有机配体)相互作用的理论研究不仅 对于改进蛋白质分析方法有实际意义，而且有助于阐明生物大分子与小分子配体相互作用 的化学本质。因而在生命科学中有重要意义。 关键词：蛋白质，光谱探针，吸收光谱，分光光度法，染料探针，金属络合物光谱探针 “ Abstract Protein was in1950sasanew for m甜】od de协Hnin“onof spectralprobeproposed anaIysis wasdeteminedditltOf searchtherelation proteins．Minimprotein by spectralpmbe，、vemight betv∞enstructureand couldsearch t}lcreactionmechanismbetweenand mnction，and Drotein smallm01ar memodhasbeen becauseitis ligalld．The considemblyrecognized simple，fast，the 谢delinear a11dtole舢tto substances，锄dWide rallge，hi曲sensitiVitymaIlyfloreign possesses ontheresearchstatusfIortlle of a11d applicationprospect．Based quo qualltitativeanalysispmtein ollr 7s