育亨宾及野核桃叶化学成分分析-analysis of chemical constituents in leaves of yohimbine and juglans regia l..docxVIP

独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□，在年解密后适用本授权书。不保密□。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日第一章育亨宾化学成分及神经保护作用研究引言育亨宾树(Pausinystaliayohimbe)原产于非洲，主要生长在非洲西海岸的热带地区。我国大陆以及港澳台地区均不生长。育亨宾树皮中的总生物碱的含量高达6.1%[1]。育亨宾的树皮自古以来被非洲土人用来催情催欲，其树皮在非洲西部也被用于治疗发烧、麻风病和咳嗽[2]。此外，它还被用于扩大瞳孔、治疗心脏病以及局部麻醉。我国民间育亨宾在西南地区也被广泛应用。在贵州地区育亨宾常用作退热、镇痛和治蛇咬伤药，而在广西地区主要用于消炎、退热和治疗伤寒等，在云南傣族地区很早就应用其具有清风热、降肝火、消肿毒的功效来治疗相应疾病[3]。育亨宾树皮中主要天然生物碱为育亨宾及其异构体，为吲哚类生物碱。从天然植物中提取的吲哚类生物碱因其具有广泛的生物活性，一直是药学工作者的关注热点。现代科学对育亨宾的研究和使用已经有上百年的历史，自1900年即被应用于治疗神经衰弱所致的阳痿及麻痹性不感症而在临床上使用，目前在临床上主要用于男性勃起功能障碍的治疗[4]。自从育亨宾在临床开始使用以来，商品化的育亨宾原料一直是从天然植物中提取[5]。但是育亨宾树在我国不生长。我国生长的植物中仅在夹竹桃科植物蛇根木(RauwolfiaserpentinaBenth.)和光亮萝芙木(RauwolfianitidaJacp.)中含少量育亨宾[6]。但其含量低，故国内药厂生产商品化的育亨宾原料一般是从非洲进口育亨宾树皮来提取育亨宾。经过调研发现，国内药厂提取育亨宾生物碱后的植物废渣都未再加以利用。而育亨宾树皮中不止含育亨宾一种生物碱，应该还含有其他生物碱以及非生物碱成分。目前国内外的研究主要集中于育亨宾树皮中的育亨宾生物碱这一种化学成分以及药理活性研究，尚未见关于育亨宾树皮的系统化学成分的研究，本课题对育亨宾树皮的化学成分进行了系统的研究，以发现该植物中的有效化学成分，使药厂丢弃的药渣能得到再利用，提高经济效益。第一节育亨宾化学成分研究1.育亨宾化学成分的提取与分离1.1育亨宾化学成分的提取天津尖锋药业提供的育亨宾树皮共13kg，粉碎后用95%的乙醇室温渗漉提取数次，合并滤液，减压蒸馏，浓缩至浸膏，得浸膏4.46kg，将该浸膏用2%盐酸溶液充分溶解，将混悬液拌硅藻土，用2%酸水洗脱。将酸水部分用氢氧化钠调PH9-10，将该碱水部分用氯仿萃取，减压浓缩，得生物碱总膏210克。经酸水洗脱后的硅藻土用甲醇洗脱，洗脱液经减压浓缩，得非生物碱总膏1850克。1.2单体化合物的分离纯化将生物碱总膏进行硅胶柱层析，湿法装柱，干法上样。以二氯甲烷-甲醇-二乙胺系统梯度洗脱，TLC指导合并，然后利用硅胶、ODS、凝胶、MCI等各种分离材料，采用常压柱层析、中压制备柱层析系统、制备薄层等各种分离手段进行分离纯化，得化合物1~5。将非生物碱总膏进行硅胶柱层析，湿法装柱，干法上样。以石油醚-乙酸乙酯-甲醇系统梯度洗脱，TLC指导合并，然后利用硅胶、ODS、凝胶、MCI等各种分离材料，采用常压柱层析、中压制备柱层析系统、高效液相等各种分离手段进行分离纯化，得化合物6~17。.具体提取分离流程如下图(Fig.1)所示：育亨宾树皮95%醇提醇提总膏2%盐酸溶解，拌硅藻土，2%酸水冲洗2%酸水部分氢氧化钠调PH9-10，氯仿萃取，减压浓缩生物碱总膏(210g)硅藻土部分甲醇洗脱，减压浓缩非生物碱总膏(1850g)硅胶柱层析硅胶柱层析硅胶，ODS，MCI等ⅠⅡⅢⅣ硅胶，ODS，MCI等1(25mg)6(15mg)8(30mg)9(17mg)15(22mg)2(20mg)3(10mg)4(6mg)5(50g)7(18mg)10(12mg)12(11mg)11(14mg)14(15mg)13(30g)16(12mg)17(28mg)2.化合物结构的研究2.1化合物小结Fig.1育亨宾提取分离流程图本实验从育亨宾中共分离纯化得到