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氨基酸酶促反应中光替代酶的研讨
\
摘要
摘要
本论文由三章组成:(1)光化学荧光分析法和模拟酶进展,(2)光替代
氨基酸氧化酶的研究,(3)光替代酪氨酸过氧化酶的研究及应用。
/
(第一章较为详细的介绍了光化学荧光分析的基本原理、实验技术及特
点,然后介绍了该技术在药物分析和生物样品分析中的应用。其次介绍了环
糊精、冠醚、胶束和金属卟啉类化合物等模拟酶体系以及模拟酶(主要是金
属卟啉类化合物模拟辣根过氧化物酶)的进展和应用。最后从光化学和光物
理的角度阐述了光替代酶的可能性,并介绍了近年来人们在实际中所做的光
替代酶的工作,并在此基础上提出了论文设想。
第二章研究了光替代苯丙氨酸、谷氨酸氧化酶的可行性及其分析应用。
首先用一定波长的光子替代苯丙氨酸氧化酶使苯丙氨酸分解并生成H:O:和
NH,,然后以氯化血红素(hemin)作为辣根过氧化酶(HRP)模拟酶催化
H202氧化对羟基苯乙酸(HPA)的荧光反应作为指示反应,测定产生的H20:
而达到间接测定苯丙氨酸。实验结果表明,一定波长的光子成功地替代苯丙
氨酸氧化酶。并在此基础上成功地用一定波长的光子替代谷氨酸氧化酶使谷
光反应作为指示反应,建立荧光法检测谷氨酸,同时应用纳氏法检测生成
的NH3,建立分光光度法测定谷氨酸,进行两种方法的比较,并应用于味精
中谷氨酸含量的测定。
第三章探索了光替代酪氨酸过氧化酶的可行性和应用。结果表明,光子
不仅可以替代酪氨酸过氧化酶,而且可以取代酶反应中的H:O:,生成的产
物同样与酶反应产物具有相同的荧光光谱特性,并建立起测定酪氨酸的新方
法,应用于啤酒和氨基酸注射液的测定。l/、/
关键词:光化学荧光,光子,氯化血红素,模拟酶。
/
Abstract
in
theadvance
Thisdissertationconsistsofthree arc
chapters,which
the asaminoacidoxidase
on
fluorimetry0CF),study
photochemical photon
for
and onthe substitution
substitute.study Tyrosine
applicationphoton
peroxidase.
of werediscussedandrecent
In and PCF
definition
1,the theory
chapter
aI“ancesand ofPCFwerereviewed.Atthesametime.we
applications
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