分子生物学——基因表达调控.pptVIP

第五章 基因表达调控 转录活性提高50倍 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 乳糖操纵子中CAP的正性调节 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP cAMP:环一磷酸腺苷 CAP：分解代谢基因激活蛋白质 (catabolite gene activator protein，CAP) CAP的活性依赖cAMP， 形成cAMP-CAP 复合物，促进多种操纵子转录起始。 cAMP与葡萄糖相关性： 葡萄糖↑，cAMP↓ 葡萄糖↓，cAMP↑ 4．转录起始的复合调控 在大肠杆菌的许多操纵子中，基因的转录不是由单一因子调控的，而是通过负调控因子和正调控因子进行复合调控。 糖代谢有关的操纵子，如lac 操纵子。 阻遏蛋白与cAMP-CAP 对乳糖操纵子转录的调控 ※单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 ※葡萄糖对lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏。 （二）转录终止的调控 转录终止调控方式分两大类： A.依赖ρ因子的终止调控 B.不依赖ρ因子的终止调控 例：色氨酸操纵子的表达调控 色氨酸操纵子的结构及其调控方式 色氨酸操纵子mRNA引导序列不同区域互补所形成的不同二级结构 色氨酸丰富时，核蛋白体顺利沿引导序列移动直达最后一个密码子UGA，合成完整的引导肽。RNA 聚合酶停止在衰减子部位。 色氨酸缺乏时，核蛋白体终止在1区Trp密码子部位，RNA 聚合酶通过衰减子区域而继续转录。 (三) 翻译水平的调控 翻译一般在起始和终止阶段受到调节。 调控分子: RNA、蛋白质 直接或间接决定翻译起始位点能否为核蛋白体所利用。 1.反义RNA的调控作用 反义RNA 能与特定mRNA互补结合的RNA片段。天然的具有功能的反义RNA分子一般在200个碱基以下。 反义RNA有三种作用方式： ①与mRNA 5ˊ端非翻译区包括SD序列相 结合，直接抑制翻译。 ②与mRNA 5ˊ端编码区起始密码子AUG结合，抑制mRNA翻译起始。 ③与mRNA的非编码区互补结合，使mRNA构象改变，影响其与核糖体结合，间接抑制了mRNA的翻译。 反义RNA调控Tn10转位酶基因的表达 2. RNA稳定性与调控的关系 mRNA稳定性与其序列和结构有关。 3.蛋白质合成的自身调控 如：核糖体蛋白 第二节 真核生物基因表达的调控 单细胞真核生物，如酵母基因表达的调控和原核生物表达的调控基本相同。 多细胞真核生物，遗传信息从细胞核的基因组DNA传递到基因编码的蛋白质均受到多层次的调控。 一、真核生物基因表达的特点 1. 细胞的全能性 2. 基因表达的时间性和空间性 Gγ δ β Aγ ζ2 α2 α1 Hb Grow1 Hb Porland Hb GrowⅡ HbF HbA2 HbA 胚胎期 胎儿期 成人期 不同发育时期 珠蛋白基因表达和血红蛋白分子类型 胚胎期 胎儿期 和 成人期 ε 3. 转录和翻译分开进行 4. 初级转录产物要经过转录后加工修饰 初级转录产物为核不均一RNA（heterogeneous nuclear RNA , hnRNA） 5. 部分基因多拷贝 6. 不存在操纵子结构 真核生物的mRNA是单顺反子mRNA (monocistronic mRNA) Translation Transcription mRNA DNA Protein Promoter Gene 3′ 5′ 单顺反子mRNA (monocistronic mRNA) （一）基因组DNA水平的调控 1.染色质丢失 不可逆调控。如一些低等生物（如线虫）体细胞发育过程中发生染色质丢失。 二、真核生物基因表达调控的机制 2.基因扩增（gene amplification） 当细胞对某种基因产物需要量剧增，单纯靠调节其表达活性不足以满足需要，只有增加这种基因的拷贝数。 3.基因重排：（gene rearrangement） V J C V J C V J C 免疫球蛋白IgG基因重排 指某些基因片段改变原来存在顺序而重新排列组合，成为一个完整的转录单位。调节表达产物多样性。 4.基因的甲基化修饰 DNA上特定的CpG序列处的胞嘧啶发生甲基化修饰（5mC）。甲基化程度与基因的表达一般呈反比关系。甲基化程