奶牛乳腺炎诊断课件.ppt

乳腺炎的病原及诊断 如何诊断乳腺炎？ 体检 炎症反应表现 乳房硬度差异 乳区大小不一 牛旁检测 CMT BMT LMT…… 亚临床乳腺炎的诊断 加州乳腺炎检测实验结果 临床乳腺炎 微生物学诊断 微生物培养 最为可靠准确的方法，但费用较高 微生物学诊断需要： 微生物学诊断过程 样品选择 样品采集方法 培养基选择 取样后应尽快接种，新鲜奶样最佳。 一种培养基的平板（如血平板）可用于培养单个乳区奶样，也可分为2～4个区域培养同一头奶牛的不同乳区奶样。 也可用选择培养基 (血平板, TKT 琼脂, 麦康凯琼脂)培养乳区奶样。 选择培养基选取原则: 麦康凯琼脂用于分离大肠杆菌属细菌 TKT 琼脂用于分离链球菌 所有细菌均可在血平板上生长 常见病原菌－大肠杆菌属培养特性 大肠杆菌 (E. coli) 血平板: 灰白色、湿润的大菌落，革兰氏阴性杆菌，不溶血 麦康凯琼脂: 乳糖阳性 (粉红色, 干燥, 扁平菌落) 粉红色区域可达琼脂内 克雷伯菌 血平板: 大菌落 (灰白色, 粘液状), 革兰氏阴性杆菌，不溶血 麦康凯琼脂: 乳糖阳性 (粉红色, 粘液状) 菌落中心突起呈“鱼眼状” 常见病原菌－链球菌 无乳链球菌 革兰氏阳性球菌, 细小菌落，触酶阴性，七叶苷阴性 ， CAMP 阳性（箭头状溶血区域）, β溶血 其它链球菌 革兰氏阳性, 细小菌落， 触酶阴性，七叶苷阳性， CAMP 阴性, 无溶血 常见病原菌－葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 血琼脂: 黄褐色大菌落，革兰氏阳性大菌落，触酶阳性 (H2O2), β溶血(双重溶血环), 凝固酶阳性 其它葡萄球菌 血琼脂：白色至黄色大菌落，革兰氏阳性球菌，触酶阳性(H2O2) ，不溶血至完全溶血，凝固酶阴性 其它病原菌－假单孢菌属 其它病原菌－化脓放线菌 经创口感染，可导致“夏季乳腺炎” 可在乳腺内形成难治愈的脓肿 血琼脂上生长缓慢，有溶血环 革兰氏阳性杆菌（形态不规则，棒状） 其它病原菌－巴氏杆菌 非常见病原，多由呼吸道传播 灰色、粘液状可融合的菌落 革兰氏阴性杆菌，两极浓染 麦康凯培养基不生长 其它病原菌－沙雷氏菌 环境病原菌，经水传播 血液培养基培养可见黄色或灰色菌落，室温培养时菌落顶部可能变成红色 革兰氏阴性杆菌 麦康凯琼脂上常为红色、半透明菌落 其它病原菌－酵母菌 多由乳房内用药过于频繁或乳房内注射污染而感染 表面干燥、平滑或环状白色菌落（上图） 表明湿润、粘液状或蜡样白色或乳白色菌落（中图） 革兰氏染色阳性，圆形或卵圆形，葡萄球菌的2～3倍大小。（下图） 其它病原菌－霉形体 霉形体性乳腺炎无法治愈 可通过检测及淘汰感染牛只进行控制 挤奶过程应与正常牛分开或使用不同机组 要严格预防，毛巾专用 诊断程序 药敏试验 药敏实验方法 药敏纸片的放置 药敏试验方法－连续稀释法 抗生素梯度敏感试验E-test? * 1.从各乳区采集奶样 2.倾出多余奶样 3.加入等量CMT检测液 4.摇动检测盘，充分混匀 差 超过5,000,000 ＋＋＋＋ 差 800,000-5,000,000 ＋＋＋ 一般 400,000-1,500,00 ＋＋ 好 150,000-500,000 ＋ 好 10,000-200,000 － 乳质量 SCC (cells/ml) 分值 患牛 正常 红 肿 热 痛 乳汁变性： 水样 血奶 絮状凝乳块 块状凝乳块 培养基：血平板和麦康凯培养基 接种环 恒温箱 培养 鉴定 采样 接种 37℃ 18～24h G－ G＋ 混合奶样用于监测群中的感染牛 乳区奶样用于检测个体牛及临床型乳房炎患牛 奶罐奶样用于监测群中传染性乳房炎问题 用哪种奶样呢？ 采样前清理乳头：挤前药浴并擦干； 用酒精棉球或棉拭子对乳头末端消毒； 采样前乳头必须擦干，用注射器或可密封的试管取样； 弃掉头几把奶，乳头呈45度角倾斜，向无菌管内采集奶样5～10ml； 用冰盒保存奶样，如需48小时后培养，可放冰箱内冷冻。 环境性病原，多经污染的用水或乳头药浴剂传播 革兰氏阴性杆菌 麦康凯琼脂上呈半透明、有光泽的菌落 · · 在培养基上放置药敏纸片 35 C，培养18-24 小时后, 测量药敏纸片周围的抑菌圈直径 药敏试验方法－纸片法 接种于MH 培养基上 合理的放置位置 不当的放置位置 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 96 孔微量板 ug/ml 64 32 16 8 4 2 *