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高效液相色谱技术在食品安全检测中应用 　　摘要：高效液相色谱技术在食品安全中起着越来越重要的作用，为人们的食品安全带来了保障。本文分析了高效液相色谱技术在食品营养成分、食品添加剂、食品有毒有害物质等检测中的应用。 　　关键词：高效液相色谱法技术 食品营养成分 食品添加剂 　　一、高效液相色谱法 　　高效液相色谱（High performance liquid chromatography，HPLC）也叫高压液相色谱（High pressure liquid chromatography），是在经典液相色谱法的基础上，于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来[1]。 　　高效液相色谱法具有适用范围广、分离效率高、速度快、流动相可选择范围宽、固定相的种类繁多、灵敏度高、色谱柱可反复使用等特点。因而，广泛应用于挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物的分离检测。 　　二、HPLC技术在食品安全检测中的应用 　　1、HPLC技术在食品营养成分检测中的应用 　　（1）糖类的检测。对于碳水化合物的测定，HPLC法操作简便，灵敏度高，可同时测定各种糖，国际上已将HPLC法作为酒类糖分含量测定的仲裁法。林婧烨等采用高效液相色谱- 蒸发光散射测定龙眼果中水溶性单糖和寡糖组分的种类和含量。 　　（2）氨基酸的检测。氨基酸是生物体中重要的生命物质，是组成酶和蛋白质的基本单元，准确灵敏地测定食物中氨基酸的含量具有十分重要的意义。目前，柱前衍生化高效液相色谱法以其灵活和易于推广的特点，逐渐取代了传统的茚三酮方法，用以检测氨基酸。刘霄玲采用柱前衍生法，用C18反相色谱柱分离试样，经HPLC测定乳制品中16种氨基酸的含量，结果表明，该方法操作简便，重现性好，色谱分离时间短且分离度好。 　　（3）维生素的检测。维生素是维持人体生命活动必需的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质，如果长期缺乏某种维生素，就会引起生理机能障碍而发生某种疾病。一般由食物中取得。[1]刘惠敏等用高效液相色谱法同时测定维生素B1和维生素B2的方法，该方法色谱条件为 uBondpak C（18）柱；甲醇/水=40/60（V/V）为流动相，流速为0.8ml/min；采用荧光检测器；平均回收率分别为95.50%和95.82%。???方法具有简单、省时、干扰小等优点，并有较高的灵敏度、准确度和宽的应用范围。 　　2、HPLC技术在食品添加剂检测中的应用 　　（1）甜味剂的检测。HPLC法可以测定食品中糖精钠、甜味素、甜蜜素、安赛蜜、甘草苷、甜菊苷等多种甜味剂，其测定人工合成甜味剂最常用的方法为RHPLC-UVD法、阴离子交换色谱法、离子对色谱法。因此，常用检测器有UVD、CD；色谱柱为C18柱、阴离子交换柱和-NH2柱。 　　（2）防腐剂的检测。HPLC法测定防腐剂方法简便、灵敏、准确。其中，BA、CA、对羟基苯甲酸乙酯（丙酯）、脱氢乙酸均可采用RHPLC测定。UVD-RID串联可同时检测甜蜜素、BA和CA。 　　（3）色素的检测。HPLC可同时测定多种人工合成色素和天然色素，方法简便。如采用HPLC-UVD，C18柱分离的梯度洗脱系统可同时测定新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红、亮蓝。 　　3、HPLC技术在食品有毒有害物质检测中的应用 　　（1）HPLC法检测农药残留 　　目前使用的农药都是有机化合物，具有强极性、热不稳定性、分子量大及低挥发性。食品中的农药残留检测主要应用气相色谱法，但对于一些对热不稳定或易失去活性和碱性条件下易分解的物质（如氨基甲酸酯农药的分析，溴氰菊酯的分析、敌克松的分析等），不能直接使用气相色谱法（GC法），HPLC法在一定程度上弥补 GC 法在测定蔬菜水果中不同种类农药的残留的缺点和不足，成为农药残留定性、定量的有效手段。 　　（2）HPLC法检测兽药残留 　　兽药残留是对食品动物用药后，动物产品的任何食用部分中的原型药物或和其代谢产物，包括与兽药有关的杂质的残留。残留较大的兽药主要包括：抗生素类、合成抗菌素类、抗寄生虫类、生长促进剂和杀虫剂等。抗生素和抗菌素是最主要的兽药。[2杨守国等建立了一种养殖海水中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星3种喹诺酮类抗生素残留量的高效液相色谱-荧光测定方法。水样经稀盐酸调pH后经HLB固相萃取柱富集、净化，用外标法定量。实验结果表明，该方法灵敏度高，重现性好，适用于养殖海水中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的检测。[3]田德金等建立了动物组织中4种苯并咪哇类药物多残留检测的高效液相串联质谱法。液质联用仪（LC-MS/Ms）检测，采用外标法定量，可用于此类药物在动物组织中残留量的定性定量检测。 　　（3）HPLC法检测食品微生物及微生物代谢物 　　食品中含有大量的微生物以及微生物的代谢