β防御素—2和γ干扰素在尖锐湿疣皮损中表达研究.docVIP

β防御素—2和γ干扰素在尖锐湿疣皮损中表达研究 　　【摘要】 目的：研究和探讨β防御素-2（HBD-2）和γ干扰素（IFN-γ）在尖锐湿疣发病和预后中的作用。方法：用免疫组化法检测HBD-2和IFN-γ在25例尖锐湿疣（CA）（初发患者）皮损、20例寻常性银屑病皮损以及25例健康人皮肤石蜡切片中的表达。SPSS 16.0统计软件进行数据分析，组间行Wilcoxon秩和检验，并进行相关性分析。结果：HBD-2、IFN-γ在尖锐湿疣皮损的表达主要见于基底层，HBD-2、IFN-γ水平明显低于银屑病阳性对照组（Z=-7.174，-7.230；P0.01）。结论：推测HBD-2、IFN-γ可能通过不同的途径共同参与了尖锐湿疣的免疫反应过程并发挥了一定的作用。 　　【关键词】 尖锐湿疣； 防御素-2； γ-干扰素 　　尖锐湿疣（CA）是由人乳头瘤病毒（HPV）感染引起的常见性传播疾病之一，主要通过性接触传染。由于CA的发病率呈上升趋势，且有资料表明，某些生殖器的乳头瘤病毒感染还与肿瘤的发生有关[1]，因此该病已引起人们的广泛重视。IFN-γ又称免疫干扰素，在拮抗细胞内病毒感染起重要作用[2]。人β-防御素2是人体中可诱导性的防御素，是机体抵御病原微生物入侵的重要组成部分，并与多种皮肤病的发生、发展相关[3]，而HBD-2与尖锐湿疣的相互关系，国外鲜有报道，国内还未曾有类似报道，笔者研究HBD-2、IFN-γ在尖锐湿疣皮损中的表达，以进一步探讨HBD-2和IFN-γ在尖锐湿疣的发病和转归中的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 标本 收集近3年经临床与病理确诊为尖锐湿疣的病例，25例入选的尖锐湿疣患者均为本院皮肤性病门诊就诊的初发CA患者，25例尖锐湿疣患者中，男15例，女10例，年龄20～65岁，病程15 d～7个月。取20例寻常型银屑病患者皮损标本作为阳性对照，男12例，女8例，年龄18～75岁，病程1个月～2年。取本院整形外科美容整形手术患者作为正常对照组，共25例，男15例，女10例，年龄16～45岁。入选所有病例3个月内均未接受免疫疗法及其他治疗，且排除自身免疫性疾病和其他感染性疾病。 　　1.2 方法 蜡块行4 μm切片，常规脱蜡、水化，柠檬酸修复，磷酸盐缓冲液（PBS）浸洗，3%过氧化氢灭活，PBS浸洗后，山羊血清室温孵育20 min，滴加一抗，HBD-2、IFN-γ的一抗来???武汉博士德公司，工作浓度分别为1：100、1：200，4 ℃过夜，PBS浸洗后，滴加二抗（武汉博士德公司），显色，封片。省略一抗作为阴性对照。 　　1.3 结果判定 显微镜下观察，HBD-2、IFN-γ以胞浆出现棕黄色颗粒为阳性。阴性结果为不着色。每张切片于光学显微镜下随机选取5个高倍镜视野（×400）。利用MIAS22000图像分析系统件测定阳性区域平均光密度值，以平均光密度值代表阳性产物表达的多少。 　　1.4 统计学处理 应用SPSS 16.0统计软件对各组平均光密度值进行数据分析，组间比较采用Wilcoxon秩和检验，指标间相关性分析采用Spearman秩相关分析，P0.01，无统计学意义，在尖锐湿疣中HBD-2和IFN-γ无相关性。 　　3 讨论 　　自1984年中性粒细胞分离出HNP-3以来，已有数十种防御素被发现，其中β-防御素2是人体中第一个被发现的可诱导的防御素，也是目前研究最深入的防御素之一。1997年Harder[4]发现银屑病角质形成细胞中HBD-2表达增高，此后在包皮、肺、气管、口腔黏膜、皮肤的上皮及肿瘤组织中均发现其表达。国内外多项研究发现，防御素有广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒活性和细胞毒性等作用并与多种疾病的发生、发展有关[5]。近年来，对艾滋病的研究发现，HIV-1诱导HBD-2mRNA的表达量为正常口腔上皮细胞产生HBD-2的4倍 [6]。研究发现HBD-2在尖锐湿疣皮损中的表达较正常皮肤高，但较银屑病皮损中的HBD水平低，推测HBD-2在尖锐湿疣的转归上有着重要的作用。 　　对IFN-γ在尖锐湿疣皮损区的表达的研究中发现，IFN-γ的表达主要见于基底层，较正常对照组及银屑病组均偏低，这与郭雨良等[7]使用ELISA法检测了尖锐湿疣疣体中IL-2和IFN-γ的水平的实验结果是一致的，这种低表达可能是导致尖锐湿疣发病和病情反复的重要原因，一些研究表明CA的发生、消退、复发及癌变都与机体的免疫功能有关[8]。尖锐湿疣患者主要是因为Th1与Th2功能失衡，Th1型细胞因子，如IFN-γ的降低使细胞免疫功能下降[9]，不能有效的清除病毒，Cauda等[10]的研究亦证明了这个观点。 　　HBD是通过各种刺激因子包括细菌和各种炎症因子刺激产生的（例如TNF-α，IFN-γ和IL-1）[11]，但是这