实验七、 植物组织RNA提取.pptx

实验七、 植物组织RNA的提取;植物RNA;真核生物mRNA结构;RNA提取;RNase酶非常稳定，耐高温，是导致RNA降解最主要的物质。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能使RNase完全失活，RNase广泛存在于人的皮肤上。 RNA提取的关键是控制RNase的污染，而手是污染的主要来源之一 DEPC（diethypyrocarbonate，焦碳酸二乙酯）和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应而抑制酶活性，用1‰ DEPC处理可以使RNase失活（但DEPC会与Tris和DTT发生化学反应而失效），所以所有的器具均需用DEPC处理过的水冲洗。玻璃器具用180℃烘烤4h以上处理。 DEPC本身是剧毒致癌物，DEPC水需高压灭菌使DEPC失活。 ;RNA反转录;反转录酶;引物的选择;Trizol法提取叶片总RNA;RNA浓度和纯度检测;RNA电泳;RT-PCR;注意事项;问题分析