高考生物总复习课件人教版高中生物选修一《DNA和蛋白质技术》专题讲解PPT课件.ppt

小思考：用猪的血液；因为猪的红细胞无细胞核，结构简单、血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。 小讨论：①PCR不需要解旋酶，而生物体内DNA复制时需要解旋酶； ②PCR需要耐热的DNA聚合酶，而生物体内DNA聚合酶在高温时会变性； ③PCR一般需经三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制。 1．实验材料 (1)动物：鸡血细 2．几种化学试剂及其作用 (1)2 mol/L的NaCl溶液：溶解DNA 析出DNA。 (2)0.015 mol/L的NaCl溶液：溶解DNA，鉴定DNA时作溶剂。 (3)0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液：防止凝血。 (4)体积分数为95%的冷酒精溶液：提纯DNA。 (5)二苯胺试剂：鉴定DNA。 3．方法目的 ①人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 ②实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。 【例1】　下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是 (　　) A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小 B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂 D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应 解析：DNA在NaCl溶液中的溶解规律如图： DNA不溶于酒精等有机溶剂，在沸水浴条件下，DNA遇苯胺显蓝色。 答案：B ?变式1：(2008年江苏高考)下列叙述中错误的是(　　) A．改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出 B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色 C．用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质 D．用透析法可除去蛋白质样品中的小分子物质 解析：DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl浓度的变化而变化。在0.14 mol/L NaCl溶液中DNA的溶解度最小，低于或高于0.14 mol/L，DNA的溶解度都会增大。在DNA粗提取实验中就是先把核物质溶解在2 mol/L NaCl溶液中，然后逐渐加水，稀释至0.14 mol/L时，使DNA析出。 答案：A 1．PCR原理 PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。 2．PCR的反应过程 (1)变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，如下图： (2)复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图： (3)延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图： 3．结果 (1)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性、延伸三步。 (2)两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。 细胞内DNA复制与PCR技术的比较 【例2】　下列操作过程的叙述中错误的是(　　) A．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸气灭菌 B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20℃储存 C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化 D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 解析：PCR所用缓冲液和酶从冰箱中取出后应放于冰块上缓慢融化，故C错。 答案：C ?变式2：一个由32P标记的DNA分子，放在未标记的环境中培养，复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的 (　　) A．1/10　　　　　 B．1/16 C．1/25 D．1/32 解析：一个DNA分子n次复制后产生的DNA数目为2n，而DNA复制是半保留复制，其特点是：新形成的DNA双链一条是来自亲代的DNA分子的母链，另一条是新形成的子链。这样最初由32P标记的DNA分子复制后，其标记的两条链就分别进入两个子代DNA分子中，即两个子代DNA分子被标记了。然而由于是在未标记的环境中培养，不论多少次复制，只有最初标记过的两条链存在的两个DNA分子中含32P，这样经n次复制，标记的DNA分子占2/2n，即1/2n－1，所以本题应选B。 答案：B 1．蛋白质分离的依据 蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来提取和分离不同种类的蛋白质。 2．方法及原理 (1)凝胶色谱法原理 (2)电泳法原理 一些生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，