香菇多糖对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长影响.docVIP

香菇多糖对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长影响 　　【摘要】 目的：探讨香菇多糖体外对双歧杆菌和大肠杆菌的生长影响。方法：2个麦氏浓度的双歧杆菌和大肠杆菌分别接种于PYG培养基中，12 h和24 h分别检测细菌数量，气相色谱法测培养24 h后的细菌培养液中乙酸含量。结果：香菇多糖体外对大肠杆菌存在抑制生长的作用，对双歧杆菌有促进生长的作用，大肠杆菌对双歧杆菌的体外生长无抑制作用，双歧杆菌、双歧杆菌+香菇多糖都能够体外抑制大肠杆菌生长；在香菇多糖作用下，双歧杆菌代谢的乙酸含量与其数量呈正相关关系。结论：香菇多糖与双歧杆菌联用可以更好的对大肠杆菌发挥生物拮抗作用；主要机制是因为香菇多糖可以作为双歧杆菌的益生元，双歧杆菌增殖后乙酸代谢也随之增加，从而抑制大肠杆菌的生长。 　　【关键词】 香菇多糖； 双歧杆菌； 乙酸； 生物拮抗 　　香菇[Lentinus edodes （Berk.） Sing]属于担子菌纲伞菌目侧耳科香菇属，是世界著名的食用兼药用菌之一，香菇中含有一种抗氧化、抗疲劳、够刺激机体的免疫系统（使机体的免疫功能得到恢复和提高）等功能的香菇多糖[1-2]，临床经验证实：注射用香菇多糖胸腔内注入对恶性胸水有较好疗效且不良反应少[3]。在调控肠道微生态方面，香菇多糖对溃疡性结肠炎大鼠肠道微生态失调也具有调整作用[4]。生理状态下，正常成人肠道内含有近500种细菌，而双歧杆菌和大肠杆菌分别是肠道中的优势厌氧菌和需氧菌，双歧杆菌是人体健康的重要标志之一，具有生物学屏障、控制内毒素血症、预防和治疗细菌性腹泻、抗肿瘤、营养、延缓衰老等作用[5]，本研究利用体外细菌培养条件单一的优势，研究香菇多糖对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 　　1.1.1 实验仪器 UV2550型分光光度计（日本 Shimadzu 公司），YQX-Ⅱ型厌氧培养箱（上海新苗医疗器有限公司），HZQ-X100型恒温振荡培养箱（江苏省金坛市汉康电子有限公司），SW-CJ-2A2D型超净工作台（青岛丹佳净化设备有限公司），GC-14C型气相色谱仪（日本岛津公司），涡旋振荡器（康宁管理有限公司）。 　　1.1.2 实验菌株 取本院健康体检青年粪便1 g，无菌条件下加入9 ml生理盐水，于振荡器上振荡5 min，使粪便均质化，继续用无菌生理盐水释至10-9倍，凃板至EMB培养基和BBL培养基上，筛选单菌落。 　　1.1.3 药物与试剂 党参多糖（武汉百兴康生物工程有限公司），PYG培养基（上海工硕生物技术有限公司），双歧杆菌液体培养基（0233），大肠埃希菌液体培养基（LB），肠杆菌选择性固体培养基（EMB），肠杆菌选择性固体培养基（BBL）。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 菌液制备 双歧杆菌和大肠杆菌分别于0233和LB培养基中培养一段时间后，采用分光光度法将菌液浓度调至2个麦氏浓度，分为6组，分别是大肠杆菌对照组、双歧杆菌对照组、大肠杆菌+香菇多糖组、双歧杆菌+香菇多糖组、大肠杆菌+双歧杆菌组、大肠杆菌+香菇多糖+双歧杆菌组。随后取制备好的菌液分别接种于10 ml PYG培养基中，香菇多糖用量为0.2 mg/管，对照组则加以等量无菌生理盐水。所有细菌于厌氧培养箱中37℃培养。 　　1.2.3 细菌培养液中乙酸含量检测 　　1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料采用 字2检验，以P 　　参考文献 　　[1] Kuppusamy U R，Chong Y L，Mahmood A A，et al.Lentinula edodes （Shiitake） mushroom extract protects against hydrogen peroxide induced cytotoxicity in peripheral blood mononuclear cells[J].Indian J Biochem Biophys，2009，46（2）：161-165. 　　[2] Zembron-Lacny A，Gajewski M，Naczk M，et al.Effect of shiitake （Lentinus edodes） extract on antioxidant and inflammatory response to prolonged eccentric exercise[J].J Physiol Pharmacol，2013，64（2）：249-254. 　　[3]冯桂阳.注射用香菇多糖胸腔灌注治疗恶性胸水的临床观察[J].中国医学创新，2013，10（3）：120-121. 　　[4]韩伟东，李丽秋