自噬相关蛋白p62及LC3在大鼠急性高眼压模型视网膜中的表达及意义硕士研究生（眼科学）开题报告课件.ppt

学院：第二临床医学院 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 自噬相关蛋白p62及LC3在大鼠急性高眼压模型视网膜中的表达及意义 研究生：郑冰茹 导师：吴瑜瑜教授 立项依据 目录 研究目的、意义 主要内容及创新点 1 2 3 4 5 8 预期结果及可能的问题 实验进展安排 6 预实验结果 立项依据 青光眼是一组以视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs)及其轴突数目进行性丢失、视盘凹陷扩大、视野缺失为特征，伴眼压升高的致盲性眼病。 立项依据 青光眼视神经病变的发病机制 立项依据 青光眼视神经病变的发病机制 氧化应激反应 神经营养因子剥夺 谷氨酸兴奋毒性反应 胶质细胞的激活 免疫调控紊乱 视神经轴突的保护 视盘重塑 RGCs的保护 立项依据 免疫调控 自噬在青光眼视神经病变发病机制中的作用 自噬 Autophagy 立项依据 自噬（ Autophagy ）即真核生物通过溶酶体机制降解细胞内组分的过程。细胞通过自噬降解胞内细胞器、微生物、可溶性蛋白及RNA以维持胞内稳态，并提供营养物质及代谢原料。 立项依据 自噬的过程 立项依据 自噬体标记蛋白LC3 定义：微管相关蛋白1 轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3/Atg8)是自噬体膜上的标记蛋白。 分类：①LC3-I蛋白：散在分布在胞浆内 ②LC3-II蛋白：定位于自噬体的内膜和外膜 检测意义：①LC3-II的水平在某种程度上反映了自噬体的数量 ②自噬时表现为LC3-I的减少和LC3-II的增加，通过LC3- II/LC3-I或者LC3-II/(LC3-I+LC3-II)即可反映自噬水平 立项依据 自噬过程的调控 [1] Mónika L, Péter L, The role of the selective adaptor p62 and Ubiquitin-Like proteins in Autophagy 立项依据 自噬相关蛋白p62 功能：在自噬降解泛素化蛋白、错误折叠及异常积累的蛋白和功能失调的细胞器的过程中起调控作用 作用机制：通过LC3相互作用区（LC3 interacting region，LIR）与自噬体膜的Atg8/LC3结合，从而介导自噬途径对异常积累蛋白及细胞器的识别及降解。 检测意义：①自噬流发生时p62水平下降 ②自噬体形成过多，或自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶 体的过程发生障碍时则p62水平增高 立项依据 p62在凋亡、细胞存活中的作用 立项依据 Kjtaoka Y [3]等人研究发现眼压稳定升高时，视神经中p62及LC3-II水平增高，提示自噬流的聚集参与其中；另外，该研究发现烟酰胺单核苷酸磷酸转移酶3(nicotinamide mononucleotide adenvlYltransferase，NMNAT)表达升高，Nmnat能维持轴突蛋白的稳定性和调制轴突内囊泡运输，对轴突发挥保护作用。抑制细胞内p62水平，促进LC3-II表达，诱导自噬并保护轴突。 Paul S [4]等人发现自噬调节蛋白p62可降解BCLl0，调控NFKBl一RELA通路，抑制T细胞分化。 [3] Kjtaoka Y, Munemasa Y, Kojima K, et a1．Axonal protection by Nmnat3 overexpression with involvement of autophagy in optic nerve degeneration[J] Cell Death Dis，2013，4：e860. [4] Paul S，Schaefer BC．Selective autophagy regulates T cell activation[J]. Autophagy，2012，8(1 1)：1690—1692． p62在青光眼视神经病变中的作用 立项依据 p62在青光眼视神经病变中的作用 研究目的及意义 研究目的 检测大鼠急性高眼压模型中RGCs凋亡率并观察其形态变化 检测p62、LC3蛋白在大鼠急性高眼压模型视网膜中的表达情况 探讨p62在大鼠急性高眼压模型视网膜中的作用及机制 探讨自