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三七总皂苷β—环糊精包合物制备工艺 　　摘要：采用乙醇回流法提取三七总皂苷（PNS），并以其含量为指标，运用正交设计的方法对三七总皂苷的β环糊精（？茁-CYD）包合物最佳制备工艺进行考察。结果表明，三七总皂苷的β-环糊精包合物最佳制备工艺为？茁-CYD与PNS质量比（以下简称主客比）3∶1，？茁-CYD饱和水溶液pH 7.0，于水浴摇床中50 ℃下作用3 h。 　　关键词：三七总皂苷（PNS）；制备工艺；β-环糊精（？茁-CYD）；包合物 　　中图分类号：R944 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）22-5564-03 　　三七总皂苷（PNS）是五加科人参属植物三七的有效活性成分，含有多种单体皂苷。具有扩张血管，降低心肌耗氧量，延长凝血时间，调节免疫等方面的药理作用，临床上主要用于心脑血管疾病的治疗[1-4]。近年来随着对其研究的不断深入，又发现其有抑癌作用[5，6]，因此越来越受到人们的重视。由于PNS具有刺激性??、味道较苦、容易吸潮等特点，其临床应用受到一定的限制。β-环糊精（β-CYD）具有一个高0.79 nm、直径为0.60～0.65 nm的非极性筒状空腔，这种特殊的分子结构赋予β-CYD可与其极性相似、分子大小与其空腔相匹配的不同类型的分子形成包合物[7]的特殊性质，β-CYD不但能够包合药物中的有效成分，同时其作为药物载体能够除去药物的异味，并提高其生物利用度[8]。以β-CYD对三七总皂苷进行包合，研究了PNS的β-CYD包合物制备工艺，以期为三七总皂苷的临床应用提供一定的参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 仪器 TU-1800紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；BP211D电子天平（北京赛多利斯）；RE-3000旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-Ⅲ型循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；TGL-16G型高速离心机（江苏金坛中大仪器厂）；电热恒热水浴锅HH. S1122（北京长安科学仪器厂）；KQ2200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；PH030恒温干燥箱（上海实验仪器厂）。 　　1.1.2 试剂 三七药材（云南产）、D101大孔树脂、β-环糊精购于泰州市医药公司；标准品人参皂苷Rg1购自贵州迪大科技/科翔生物科技有限责任公司。硅胶G，泰州市恒泰器化玻有限公司。5%香草醛溶液（500 mg香草醛溶于10 mL冰醋酸，新鲜配制），高氯酸，其他化学试剂均为分析纯。 　　1.2 方法 　　1.2.1 三七总皂苷的制备 称取三七1 kg，采用正交试验优化三七总皂苷提取工艺，选取最佳提取条件。按Sun等[9]所报道的方法，制备PNS。 　　1.2.2 含量测定 　　1）对照品溶液的制备。精确称取在60 ℃减压干燥至恒重的人参皂苷Rg1对照品2.48 mg于25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，即为0.099 2 g/L的对照品溶液。 　　2）供试品溶液的制备。精确称取包合物2.48 mg于25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，即为0.099 2 g/L的供试品溶液。 　　3）检测波长的确定。吸取标准溶液，显色，经TU-1800紫外可见分光光度计在800～200 nm范围内扫描，选定最大吸收波长560 nm为测定波长。 　　4）标准曲线的绘制。精确吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL的对照品溶液，分别置于10 mL具塞试管中，挥干溶剂，加入新配制的5%香草醛溶液0.2 mL，高氯酸0.8 mL，在60 ℃水浴中加热15 min，立即置冷水中冷却，加入冰醋酸5.0 mL摇匀，放置15 min，相应试剂设置空白对照，在波长560 nm处测定吸光度A，以吸光度为横坐标，人参皂苷Rg1含量（mg/mL）为纵坐标，得回归方程为■=0.231 9 x-0.000 9， r=0.999 4。结果表明，人参皂苷Rg1为0.049 6～0.297 6 mg/mL时有良好线性关系[10]。 　　5）包合率的确定。根据上述方法分别计算包合物和包合前三七总皂苷的含量，取两者的比值即为包合率。 　　1.2.3 包合方法的选择 分别用下列两种方法处理，最后以分别计算包合率选择最佳的包合方法。超声波法：将β-CYD配制成饱和水溶液，50 ℃下加入0.1 g三七总皂苷溶解后，立即用超声波清洗机处理，抽滤，无水乙醇洗涤沉淀，干燥，计算包合率；过饱和溶液法：取β-CYD 0.3 g，加入3.0 mL去离子水，50 ℃溶解，加入0.1 g三七总皂苷，搅拌溶解，至水浴浓缩，冷藏过夜，抽滤，无水乙醇洗涤沉淀，干燥，计算包合率。结果表明，超声波法优于过饱和溶液法，故选用超声波法进行试验。 　　2 结