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胰酶对蛋白质的消化和影响没作用的因素
胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素 周 鹏 实验目的 1.学习和掌握影响酶作用的因素. 2.熟悉酶的催化作用. 实验原理 蛋白质或者多肽物质在蛋白质水解酶的作用下水解肽键,生成小分子肽或氨基酸. 酶是生物催化剂,其活性受到很多因素的影响.包括酶浓度,底物浓度,温度,pH值,抑制剂和激活剂等. 本次实验以曝光定影照相底片上的白明胶作为蛋白质底物,观察动物胰酶对蛋白质的消化作用.随着白明胶的不断水解,已还原的黑色银颗粒逐渐从底片片基上脱落下来,底片逐渐变透明.根据底片是否变透明以及变透明的程度来判断胰酶活性的高低. 实验材料 器材:曝光定影的照相底片,试管及试管架,吸量管,恒温水浴箱 试剂: (1)胰酶溶液 (2)0.1mol/L磷酸缓冲液(pH=5.0) (3)0.1mol/L磷酸缓冲液(pH=5.0) (4)0.1mol/L磷酸缓冲液(pH=7.0) (5)0.1mol/L磷酸缓冲液(pH=10.0) (6)0.2mol/L HgCl2溶液(剧毒) (7)0.2mol/L NaCl溶液 实验步骤 取试管,编号 密切观察各支试管底片的变色情况以及溶液的形状变化(间歇摇动试管) 当某一支试管中的底片刚刚变为透明时,迅速取出各管.小心将各管的溶液倒出去,注意不要将底片倒出,以蒸馏水反复冲洗底片以除去胰酶 取出各管底片,晾干,按顺序贴在实验报告纸上.注意不要弄乱顺序 比较各管底片的变化,解释结果 一.温度对酶活性的影响 二.酶浓度对酶活性的影响 三.pH对酶活性的影响 四.抑制剂对酶活性的影响 注意事项: 研究某一因素时,严格控制其他因素保持不变,只改变要研究的因素. 掌握好水解程度是本实验的关键之一. HgCl2溶液有剧毒,操作过程中要小心严禁,严防中毒. * *
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