骨形态蛋白受体1a1b在u87-mg的胶质瘤干样细胞中的表达及其意义-expression and significance of bone morphogenetic protein receptor 1a1b in u87 - mg glioma stem-like cells.docxVIP

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2018-07-05 发布于上海
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骨形态蛋白受体1a1b在u87-mg的胶质瘤干样细胞中的表达及其意义-expression and significance of bone morphogenetic protein receptor 1a1b in u87 - mg glioma stem-like cells

华中科技大学硕士学位论文华中科技大学硕士学位论文 PAGE 10 PAGE 10摘要目的：鉴定胶质母细胞瘤细胞系 U87-MG 中的胶质瘤干样细胞的存在情况，并检测 U87-MG 在普通培养、干细胞培养及分化培养等三种培养条件中骨形态蛋白受体 1A/1B（BMPR1A/1B）的表达情况，以期探讨 BMPR1A/1B 对胶质瘤干样细胞所起的生物学作用。方法：①利用流式细胞术鉴定 U87-MG 细胞中 CD133 和 Nestin 阳性表达的细胞的存在情况，②细胞免疫荧光法检测 U87-MG 在干细胞培养条件下 Nestin 的表达情况及分化后 GFAP 和β-tubulin 的表达情况，③Western blot 和细胞免疫荧光法检测 U87-MG 细胞在普通培养、干细胞培养及分化培养等三种培养条件中 BMPR1A/1B 的表达情况。结果：①CD133 和 Nestin 阳性表达的细胞在胶母细胞系 U87-MG 中所占的比例分别约为 0.92%和 5.72%，②U87-MG 胶质瘤干样细胞中 BMPR1A 表达明显增强，而 BMPR1B 略有增强。结论：BMPs 信号通路中重要的膜表面分子 BMPR1A 对调控胶质瘤干样细胞的生长分化可能起有重要作用。关键词：骨形态蛋白受体 1A/1B；胶质瘤干样细胞；CD133；U87-MGAbstractObject: To identify the presence of glioma stem-like cells in glioblastoma cells U87-MG, and to detect the expression of BMPR1A/1B of U87-MG in ordinary, stem-like and differentiate cultivations, with a view to exploring BMPR1A/1B on glioma stem-like cells biological role played by.Method: ① Using flow cytometry to identify the presence ofCD133 and Nestin positive expression cells in U87-MG cells, ② Detecting the expression of Nestin of U87-MG in stem-like cultivation and GFAP and β-tubulin in differentiate cultivation by immunofluores-cence, ③ Detecting the expression of BMPR1A/1B of U87-MG inordinary, stem-like and differentiate cultivations by immunofluorescence and Western blot assay.Result: ① CD133 and Nestin positive expression of cells in thedepartment of glioblastoma cells U87-MG represented approximately 0.92% and 5.72% respectively, ②The expression of BMPR1A in Glioma stem-like cells increased markedly , while which of BMPR1B enhancedslightly.Conclusion: The important molecules BMPR1A in BMPs signal pathway may play an important role on the regulation of the growth and differentiation of glioma stem-like cells.Key words：BMPR1A/1B；glioma stem-like cells；CD133；U87-MG引言胶质瘤是脑肿瘤中最常见的类型之一，胶质母细胞瘤是胶质瘤中恶性程度最高的。一直以来，人们总在寻求能够治愈胶质瘤的方法，如手术方法的改进、放疗、化疗等等，但效果还是不理想。自 2003 年 Singh 分离并鉴定了脑肿瘤干细胞以后[1]，人们便对这一新类型细胞产生了浓厚的兴趣。人们对脑肿瘤干细胞的理解是从神经干细胞开始的。Singh将标记有神经干细胞表面标记抗原CD133的脑肿瘤细胞群分选出来，