特女贞苷与红景天苷大鼠在体胃肠吸收比较.docVIP

特女贞苷与红景天苷大鼠在体胃肠吸收比较 　　[摘要]特女贞苷与红景天苷是女贞子炮制前后含量变化较大的2种活性成分。为探讨女贞子炮制增效机制，该实验采用大鼠在体胃肠灌流模型，用HPLC测定给药后不同时间点大鼠胃与小肠灌流流出液中特女贞苷与红景天苷含量并计算吸收速率常数和吸收百分率，结果在特女贞苷的胃肠灌流流出液中均可检出其次级苷红景天苷。特女贞苷与红景天苷在小肠中的吸收速率常数分别为0.055 3， 0.144 2 h-1， 4 h累计吸收率分别为24.46%， 60.14%，在胃中吸收速率常数分别为5.70， 8.26 h-1，4 h累计吸收率分别为34.21%， 47.23%。实验证明特女贞苷在大鼠胃与小肠内均可被代谢为红景天苷，红景天苷较特女贞苷更利于胃肠吸收。结果提示女贞子炮制后补肝肾药效增强与特女贞苷转化为红景天苷后更利于机体吸收有关。 　　[关键词]特女贞苷；红景天苷；在体胃肠吸收；女贞子 　　女贞子为临床常用中药，具有滋补肝肾、明目乌发的功效。酒蒸女贞子可缓和其寒滑之性，增强补肝肾作用，故历代临床应用中女贞子均以酒制品为主。女贞子主要含有环烯醚萜苷类、三萜类和苯乙醇类成分。特女贞苷（双糖苷）为女贞子的主要活性成分，具有增强免疫作用[1]。《中国药典》2010年版规定，女贞子与酒女贞子饮片中特女贞苷含量均不得少于0.70%[2]。红景天苷（单糖苷）为特女贞苷的次级苷，是红景天的主要活性成分，具有保护心脑血管、抗肝纤维化、抗肿瘤、增强免疫及改善认知能力等作用[3]。《香港中药材标准》2010年版规定了女贞子药材中红景天苷的限量[4]。本课题组前期研究发现，女贞子经酒蒸或清蒸后，特女贞苷含量显著降低，而红景天苷和酪醇含量显著升高[5-6]，但女贞子酒蒸增效机制尚未阐明。药代学研究表明，红景天苷口服后吸收迅速，生物利用度良好[7]，但未见特女贞苷的药代学研究报道，特女贞苷与红景天苷在体内的吸收代谢有何差异也未见报道。本实验采用大鼠在体胃肠吸收法，研究特女贞苷和红景天苷在大鼠胃和小肠的吸收差异；通过标准品对照，分析特女贞苷的大鼠胃肠代谢产物。为揭示女贞子酒蒸增效机制及女贞子饮片的药效物质基础提供科学依据。 　　1 材料 　　1.1 动物 　　雄性SD大鼠，体质量（200±20） g，由山东中医药大学试验动物中心提供，动物许可证号SYXK（鲁 　　1.2 药品与试剂 　　特女贞苷（本实验室自制，经HPLC归一化法检测，质量分数为98.1%）；红景天苷（中国食品药品检定研究院，供含量测定用，批号110818-200404）；Kreb-Ringer′s营养液（简称K-R液，自制）；水合氯醛、酚红（分析纯）；高效液相用乙腈（色谱纯）。 　　1.3 仪器 　　L-2000型高效液相色谱仪（日本日立公司）；UV-2000型紫外-可见分光光度计（河南兄弟仪器设备有限公司）；HL-2恒流泵（上海嘉鹏科技有限公司）。 　　2 方法与结果 　　2.1 实验用试液的配制 　　K-R营养液的配制：分别称密称取NaCl 7.80 g， KCl 0.35 g， NaHCO3 1.37 g， NaH2PO4 0.32 g， MgCl2 0.02 g， 葡萄糖1.40 g，加适量纯化水溶解， 加水至1 000 mL，混匀即得。 　　特女贞苷、红景天苷对照品溶液的配制：分别称取特女贞苷对照品和红景天苷对照品适量，精密称定，分别置于10 mL量瓶中，加乙醇定容，制成每1 mL含特女贞苷0.358 mg的对照品溶液和每1 mL含红景天苷0.334 mg的对照品溶液。 　　特女贞苷、红景天苷胃肠灌注液的配制：精密吸取特女贞苷对照品溶液和红景天苷对照品溶液各5 mL，分别置于100 mL量瓶中，精密加入质量浓度为1.008 g?L-1的酚红溶液2 mL，再分别用K-R液定容制成每1 mL含特女贞苷17.9 μg的胃肠灌注液和每1 mL含红景天苷16.7 μg的胃肠灌注液。 　　2.2 大鼠在体小肠吸收试验[8] 　　将SD大鼠禁食20 h，不禁水，腹腔注射10%水合氯醛溶液（3 mL?kg-1）麻醉后，固定。保持37 ℃体温，沿腹中线剪开腹部，选取整个小肠肠段，在两端各切一小口，在两端小口处插入直径为0.3 cm的橡胶插管，并用线扎紧。先将橡胶管放入37 ℃的生理盐水中，以5 mL?min-1流速洗去肠管内容物至肉眼观察流出液澄清。然后换成37 ℃ K-R营养液，平衡肠腔内环境，排净肠内生理盐水。取预热至37 ℃的特女贞苷胃肠灌注液和红景天苷胃肠灌注液各90 mL，先以5 mL?min-1流速循环10 min后，再将流速调至2 mL?min-1并开始计时。取样时间点为0，0.25，0.5，1，1.5，2，2.5，3，4 h，取样量为2 mL（同