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几种牧草根际土壤微生物功能多样性分析 　　摘要：以宁夏中部干旱带引进的适生牧草品种（710、708、376、859）和蒙古冰草根际微生物为研究对象，采用 Biolog-Eco方法研究了5种牧草的根际微生物群落功能的多样性。结果表明：5种不同牧草根际土壤微生物活性存在差异；利用羧酸类、碳水化合物最多的是牧草376，利用聚合物类、酚类化合物、氨基酸类最多的是708，利用胺类最多的是蒙古冰草；5个品种主要利用碳源类型为碳水化合物、羧酸类和氨基酸类。丰富度指数与优势度指数结果相似，为859≥蒙古冰草≥710708376；多样性和均匀度指数结果一致，为蒙古冰草859708376710；主成分分析将5种品种分为3个功能类群，376和708为一类，859和蒙古冰草为同一类，710为一类；载荷矩阵表明5中牧草品种在羧酸和氨基酸利用上差异最大。 中国论文网 /1/viewhtm　　关键词：Biolog-Eco；根际土壤；功能多样性；牧草 　　中图分类号： S154.3文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）02-0360-04 　　收稿日期：2015-08-13 　　项目基金：宁夏农林科学院科技创新先导资金（编号：NKYJ-2014-11）；宁夏自然科学基金（编号：NZ1073）。 　　作者简介：杨炜迪（1983―），女，河南偃师人，硕士，助理研究员，研究方向为牧草育种。E-mail：12345ywol@163.com。 　　通信作者：高婷，硕士，研究员，研究方向为牧草新品种选育。E-mail：ecogt9@163.com。根际是指植物根周围数毫米的区域[1]，此区域中根分泌物为微生物提供重要的营养和能量物质并影响着根际微生物的种类和繁殖，而根际微生物的代谢作用又直接促进或抑制根的营养吸收和生长，从而影响根际土壤中的物质转化[2]。Biolog-Eco 法是在微生物利用31种碳底物时发生氧化还原反应，通过颜色变化情况来反映微生物碳源利活性的方法[3-4]。该技术广泛应用在评价和比较不同土壤类型[5]、相同土壤不同植物物种[6]、不同植被的根际土壤微生物群落功能多样性[7]。本研究以4种美国引进牧草和蒙古冰草的根际微生物为研究对象，应用 Biolog-Eco方法，对不同牧草品种根际土壤微生物代谢功能多样性进行比较研究，旨在探讨不同牧草品种根际微生物代谢功能多样性之间的差异，研究结果可为深入探讨植物多样性和土壤微生物多样性之间的关系奠定基础。 　　1材料与方法 　　1.1试验地概况 　　试验地设在宁夏吴忠市盐池县高沙窝的天然草场。草地类型为荒漠草原，植被稀疏且草层低矮，主要植被类型为蒙古冰草（Agropyron mongolicum Keng.）、糙隐子草（Cleistagenes squarrosa）、胡枝子（Lespedeza bicolor Turcz.）、老瓜头（Cynanchum komarovii Al.）、甘草（Glycyrrhiza）、细叶骆驼篷（Peganum nigellastrum）、银灰旋花（Convolvulus ammannii Desr.）。盖度为17%～30%，种类组成贫乏。该区属于典型的大陆性气候，春季干旱多风，夏季炎热，年均降水量260.75 mm，主要集中在7―9月，月平均温度最高月为6月（23.5 ℃）、7月（24 ℃）和8月（20.5 ℃），土壤为风沙土，土壤有机质 1.4%～7.5%，pH值9.08～9.22。 　　1.2牧草品种 　　本试验选取4个引进美国品种（710、708、376、859）和本地优势品种蒙古冰草开展研究。710品种耐寒性、耐旱、耐高温能力强；708粗蛋白质含量高、干草产量高；376青绿期长、适口性好；859株高大、鲜草产量高；蒙古冰草植株高大，生长速度快。 　　1.3播种 　　将美国引进的牧草品种，随机排列，小区面积为25 m2，行距25 cm，对试验地隔带深翻后，于2011年4月28日至5月1日播种，深翻比例介于30%～80%，每品种重复3 次。取样时引进牧草品种生长年限为4年。 　　1.4土壤采集 　　6月下旬在盐池县高沙窝天然草场对5种牧草品种按五点取样法选取牧草植株，每点每品种取3～5株，重复3次。将根系区域土样用铁铲挖出，抖落根系外围土，取紧贴于根表周围的土样。将土样装入无菌纸袋，标记，立即带回实验室，研磨过1 mm筛后于4 ℃冰箱保存。 　　1.5牧草根际土壤微生物群落功能多样性研究 　　Biolog-Eco分析：本研究采用有31 种碳源的生态板（规格为EcoPlate，由Biolog 公司生产，华粤企业集团有限公司提供）分析微生物群落的代谢特征。每品种土样均匀混合后按照四分法称取10 g，加入90 mL无菌生理盐水稀释，在摇床里振摇