动物繁殖学ppt课件华中农业大学第19讲.pptVIP

华中农业大学动科动医学院 一、性别鉴定的方法 （一）细胞遗传学方法 2．X-连接酶测定法 测定X染色体有关的酶的活性的高低。 短暂时期内，雌性的两条X染色体都可以被转录和翻译，雌性胚胎中与X染色体相关酶的细胞内浓度及活性是雄性胚胎的两倍。 * * 华中农业大学动科动医学院 一、性别鉴定的方法 （二）SRY基因探针法 1990 年，英国学者 Sinclair 和 Gubbay发现，哺乳动物Y 染色体短臂上靠近常染色体区的 35Kb 区域存在性别决定区， 即 SRY 基因。 * * 华中农业大学动科动医学院 荧光原位杂交 (Fish) 探针首先与报告分子（reporter molecular）结合、杂交，杂交后再通过免疫细胞化学过程连接荧光染料而进行标记。 1~2枚分裂球 , 2h。 阳性，则胚胎为雄性胚胎，反之，则为雌性胚胎。 一、性别鉴定的方法 * * 华中农业大学动科动医学院 （三）PCR法性别鉴定 PCR扩增Y染色体上SRY基因的检测技术。 胚胎分割结合，几个细胞即可检测。 有条带为雄性胚胎，无条带为雌性胚胎。 一、性别鉴定的方法 * * 华中农业大学动科动医学院 PCR结果图示 样品孔 内标 雄性特异条带 ♀ ♂ ♂ * * 华中农业大学动科动医学院 1、精子鉴定及分离 X-精子、Y-精子（吸附、电泳） 2、个体鉴定 染色体（组型） Y-染色体（SRY 探针法） 二、性别控制的方法 * * 华中农业大学动科动医学院 1、流式细胞分类术分离精子 (一) 流式细胞术分离X精子和Y精子理论基础 DNA含量不同 X精子DNA含量大于Y精子 人的X精子染色体的DNA含量大约比Y精子的多2.8%~3.0% * * 华中农业大学动科动医学院 1、流式细胞分类术分离精子 （二）流式细胞术分离X精子和Y精子工作原理 * * 华中农业大学动科动医学院 1、流式细胞分类术分离精子 （三）精确性与有效性评价 流式细胞术分离X精子和Y精子的纯度能达到90%左右。 Johnson（1989）等对分离精子对母兔宫内受精，其中用X精子受精产下的仔兔中94%是母兔，由Y精子受精产下的仔兔中81%是公兔。 * * 华中农业大学动科动医学院 1、流式细胞分类术分离精子 （三）精确性与有效性评价 Johnson（1991）等又对猪做同样的处理，结果分别产下了74%的雌性和68%的雄性仔猪。 Cran（1993）和Seidel（1997）等报道，用分离的Y精子进行人工受精（AI）或体外受精（IVF）和胚胎移植（ET）后产下的67头犊牛中，90%为公犊牛，用分离的X精子做相同的处理后产下139头犊牛，其中83%为母犊牛。 * * 华中农业大学动科动医学院 三、流式细胞分类术分离精子 （四）优缺点 准确性高 分离速度慢 仪器昂贵，成本高 * * 华中农业大学动科动医学院 第六节 转基因技术 1、概念 转基因技术就是用实验室方法将所需要的目的基因导入动物的受精卵，使外源基因与动物本身的基因整合在一起，在动物发育过程中表达，并能稳定地遗传给后代的技术。这种在基因组中稳定地整合有人工的外源基因的动物称转基因动物（transgenetic animal，TA） * * 华中农业大学动科动医学院 你吃过转基因食品吗？ 不管您愿不愿意，您己经或正在把转基因食品吃进肚里…… * * 华中农业大学动科动医学院 国内尚没有转基因作物的大规模生产 近几年，我国大量从美国、阿根廷等国进口大豆，其中大部分是转基因大豆 我国有一半以上的大豆色拉油含有转基因成分 * * 华中农业大学动科动医学院 第一批列入目录的农业转基因生物是： 大豆：大豆种子、大豆、大豆粉、大豆油、豆粕 玉米：玉米种子、玉米、玉米油、玉米粉 油菜：油菜种子、油菜籽、油菜籽油、油菜籽粕 棉花: 棉花种子 番茄：番茄种子、鲜番茄、番茄酱 现在国内都有哪些转基因食品？ * * 华中农业大学动科动医学院 现在市场上常见的小西红柿算是转基因食品么？ * * 华中农业大学动科动医学院 利用转基因技术进行动物生产改良、培育新品种和提高生产性能，进行基因治疗 利用转基因动物制造具有生物活性的产物，包括器官移植和生物反应器 利用转基因动物确定研究手段，包括建立疾病模型和发育调控 2、转基因动物的应用 * * 华中农业大学动科动医学院 * * 华中农业大学动科动医学院 外源目的基因的制备 外源目的基因有效导入生殖细胞或胚胎干细胞 选择获得携有目的基因的细胞 选择合适的体外培养系统和宿主动物 转基因细胞胚胎发育及鉴定 筛选所得的转基因动物品系 3、转基因动物的关键技术 * * 华中农业大学动科动医学院