玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63抗生素生物合成基因相关线性质粒的研究-study on linear plasmids related to antibiotic biosynthesis gene of streptomyces roseofluoensis men - myco - 93 - 63.docxVIP

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玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63抗生素生物合成基因相关线性质粒的研究-study on linear plasmids related to antibiotic biosynthesis gene of streptomyces roseofluoensis men - myco - 93 - 63

独 创 性 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人 已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得河北农业大学或其它教育机构的学 位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论 文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名: 签字日期: 年 月 日 关于论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留及使用学位论文的规定,有权保 留并向国家有关部门(机构)送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查(借)阅。 本人授权河北农业大学可以将论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可 以采用影印、缩印或扫描等方法加以保存或编成学位论文。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 学位论文作者签名: 导师签名: 签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日 玫瑰黄链霉菌 玫瑰黄链霉菌 Men-myco-93-63 抗生素生物合成基因相关线性质粒的研究 河北农业大学硕士学位(毕业)论文 河北农业大学硕士学位(毕业)论文 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 10 引 言 链霉菌(Streptomyces)是一类革兰氏阳性放线菌,具有类似真菌的复杂的形态分化周期,包括 孢子萌发、基质菌丝、气生菌丝、孢子链形成以及成熟孢子释放,是研究原核生物发育分化的良 好模式材料;同时,链霉菌能够产生丰富的次级代谢产物,包括抗生素、色素、酶抑制剂以及免 疫调节剂等,被认为是最大的天然抗生素的合成工厂,目前所发现的 12 000 余种抗生素中约 70% 是由链霉菌产生的,其中许多已在人类医药(如抗肿瘤等)、农业和畜牧业中体现出重要的应用 价值。因此,对链霉菌的分子生物学研究,尤其是抗生素生物合成的研究,具有重要的理论意义 和实际应用价值。同时,与真核生物相比,链霉菌的细胞结构和遗传物质均相对简单,只有一条 染色体,且基因内部无内含子,使得对其基因结构、功能及分子调控机制的研究更为容易,具有 更大的优越性。 1 玫瑰黄链霉菌研究进展 玫瑰黄链霉菌(Streptomyces roseoflavus)最早由 Arai 于 1951 年分离,代表菌株为 Chiba320 = IMRU3672 =ISP5536,与细黄链霉菌(S. microflavus)和玫瑰暗黄链霉菌(S. roseofulvus)相似,归粉 红孢类群[1]。该菌株产生一种与新霉素相似的碱性大环内酯类抗生素—黄霉素(flavomycin),为广 谱抗细菌抗生素,可抑制革兰氏阳性和阴性细菌及分枝杆菌。有的菌株产生黄霉素的同时还产生 抑制丝状真菌和酵母的菌丝体素 (mycelin),与弗氏菌素(fradicin)相近或相同。Lanoot 等运用 BOX-PCR 指纹技术研究证明,玫瑰黄链霉菌与弗氏链霉菌(S. fradiae)同种异名[2]。迄今为止 已报道了多种玫瑰黄链霉菌菌株,可产生大环内酯类、氨基糖苷类及多烯类等多种抗生素(表 1), 可以抑制细菌、真菌、酵母菌等多种植物病原菌。 表 1 玫瑰黄链霉菌产生的抗生素 Table1 Antibiotics of Streptomyces roseoflavus 菌 株 抗生素(抗细菌) 抗生素(抗真菌) 文 献 S. roseoflavus 黄霉素(与新霉素相近) 菌丝体素(与弗氏菌素相近或相同) [1][3][4] S. roseoflavus var. jenensis 黄霉素 [5][6] S. roseoflavus roseofungini 玫瑰真菌素 [7][8] S. roseoflavus US80 S. roseoflavus LS-A24 S.roseoflavus subsp. hangzhouensisn. 人间霉素 沙星菌素 杀黑腥菌素和 X14952B 星形孢菌素(staurosporin) [9] [10] [11] 2 抗生素生物合成基因簇的组成特点及克隆策略 自 1984 年克隆了放线紫红素的全部生物合成基因,以及随后克隆的榴菌素、红霉素、泰乐 星等生物合成基因,揭示了链霉菌次级代谢产物生物合成基因成簇排列的特征,即与特定产物合 成相关的结构基因、调节基因、耐药性基因和转运蛋白等集中位于一段连续区域。此外,链霉菌 次级代谢产物生物合成基因簇还具有以下几个特点:①通常含有一个以上的耐药性基因,且耐药 性基因和结构基因表达之间有一定的相互调节;②绝大多数基因表达的调控发生在转录水平,除 了受特异的途径专一性调节因子调控外,还受到同时影响胞内其它产物合成甚至细胞分化的全局 性调节因子的调控[12];③生物合成基因一般形成几个不同的转录单位。链霉菌次

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