慢性间歇性低氧对牙周炎大鼠il-6 pge2及nf-κb含量的影响-effects of chronic intermittent hypoxia on il - 6 pge 2 and nf - κ b contents in periodontitis rats.docxVIP

致 谢 42 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果43 个人简历 44 山西医科大学硕士学位论文 山西医科大学硕士学位论文 慢性间歇性低氧对牙周炎大鼠 IL-6、PGE2 及 NF-κB 含量的影响 摘 要 目的： 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（Obstructive Sleep Apnea-Hypopnea Syndrome， OSAHS）是指患者出现了通气不足及呼吸暂停等由上呼吸道阻塞引起的症状，同时 伴有白天嗜睡与夜间打鼾、睡眠结构紊乱及高碳酸血症等病征，导致多种并发症及多 脏器严重损害，影响患者的生活质量和寿命。国外调查显示，OSAHS是多种全身系 统疾病的危险因素，约 2%-4%成年人患有此疾病。牙周炎（Periodontitis）是由牙菌 斑生物膜引起的、累及牙齿支持组织的慢性进行性、感染性疾病。研究证实，持续性 缺氧对牙周膜成纤维细胞的结构和功能造成影响，牙周组织破坏加剧。国外学者研究 发现，OSAHS 患者较正常人更易患牙周炎，睡眠呼吸暂停（Obstructive Sleep Apnea， OSA）是牙周炎的危险因素之一。而 OSAHS 病理特征是慢性间歇性低氧(Chronic Intermittent Hypoxia，CIH)-复氧，这为本实验提供了设计思路。因此本研究目的为 在 CIH 条件下建立牙周炎大鼠模型，研究血清中 IL-6、PGE2 及牙周组织中 NF-κB 的含量变化，进一步探究二者的相关性。 方法： 1、建立慢性间歇性低氧条件下牙周炎大鼠模型：选用32只健康清洁级雄性SD大 鼠（约200克/6周龄），随机分为4组：A：常氧空白组；B：常氧牙周炎组；C：间歇 性低氧组；D：间歇性低氧+牙周炎组。每组8只。采用正畸结扎丝（0.20mm）结扎于 B、D两组大鼠上颌双侧第二磨牙，配合高糖饮食。A、C组不作牙周处理，正常饮食， 常氧环境。C、D组正常喂养的同时放入低氧舱内建立间歇性低氧环境，每天8小时。 实验8周后处死。 2、氧浓度检测：测氧仪放入低氧舱中实时监测氧浓度，低氧舱设置：通氮气70s， 保持缺氧状态25s，通氧气25s；2mins为一循环。 I II II 3、牙周检查：建模8周后麻醉大鼠，记录实验牙探诊深度(Probing Depth，PD) 及龈沟出血指数(Sulcus Bleeding Index，SBI)。 4、样本采集：建模8周后，采集腹主动脉血，大鼠上颌骨经固定、脱钙、包埋、 HE染色、封片后，光镜观察并采集图像。 5、采用ELISA法检测各组动物血清IL-6和PGE2含量，免疫组织化学法检测牙周 组织中NF-κB表达情况。 结果： 1、一般情况：C、D 组大鼠进入低氧舱后，半小时内较为兴奋，行动积极，但 随间歇性低氧-复氧循环的进行及通气时间延长出现呼吸加深、加快，腹式呼吸明显， 行动迟缓。 2、牙周检查：A、C 组大鼠未见明显牙周炎表现；B、D 组大鼠牙周袋可探及， 探诊出血。探诊深度（PD）及龈沟出血指数（SBI）以 A 组最低，D 组最高，B 组高 于 A 组、D 组高于 C 组、C 组高于 A 组、D 组高于 B 组，差异有统计学意义（P0.05）。 3、病理学结果：HE 染色显示 A、C 组未见明显牙周炎病理变化，牙槽嵴基本完 整；B、D 组切片显示结合上皮根方移动，牙槽嵴出现吸收。 4、ELISA 结果：D 组 IL-6、PGE2 含量最高，A 组最低。B 组高于 A 组、D 组高 于 C 组、C 组高于 A 组、D 组高于 B 组，差异有统计学意义（P0.05）。 5、免疫组织化学染色结果：A 组弱阳性表达，B、C、D 强阳性表达。ImagePro Plus 软件分析后结果显示，B、C、D 组平均光密度（Average Optical Density，AOD） 均高于 A 组；且 D 组高于 C 组、D 组高于 B 组，差异有统计学意义（P0.05）。 结论： 1、本实验成功建立慢性间歇性低氧大鼠牙周炎模型。 2、牙周炎时大鼠血清中 IL-6 及 PGE2 含量升高，间歇性低氧可促进实验大鼠血 清中 IL-6 及 PGE2 进一步增加，从而加重牙周炎症程度。血清中炎症因子与探诊深度 （PD）和龈沟出血指数（SBI）的变化趋势一致，能较好的反映间歇性低氧条件下牙 周炎症情况。 PAGE PAGE III 3、间歇性低氧使大鼠牙周组织中 NF-κB 表达升高，提示 NF-κB 表达增加与间歇 性低氧牙周炎发病过程有关。 4、间歇性低氧条件下牙周炎症程度加重，提示间歇性低氧和牙周炎具有相关性。 关键词：牙周炎；慢性间歇性低氧；白细胞介素-6；前列腺素 E2；核转录因子-κB PAGE PAGE IV The changes of IL-6, PGE2