深度测序对单细胞21-三体诊断的可行性分析-feasibility analysis of deep sequencing for diagnosis of single cell trisomy 21.docxVIP

解放军医学院硕士学位论文 解放军医学院硕士学位论文 目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 中英文缩略词表 1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要 3 HYPERLINK \l _bookmark2 英文摘要 5 HYPERLINK \l _bookmark3 前 言 7 HYPERLINK \l _bookmark4 第一部分 深度测序对基因组 DNA 检测的稳定性研究 11 HYPERLINK \l _bookmark5 引 言 11 HYPERLINK \l _bookmark6 对象与方法 12 HYPERLINK \l _bookmark7 实验结果 16 HYPERLINK \l _bookmark8 讨 论 17 HYPERLINK \l _bookmark9 结 论 20 HYPERLINK \l _bookmark10 第二部分 深度测序对 21-三体不同浓度 DNA 样本的检测 21 HYPERLINK \l _bookmark11 引 言 21 HYPERLINK \l _bookmark12 对象与方法 21 HYPERLINK \l _bookmark13 实验结果 26 HYPERLINK \l _bookmark14 讨 论 29 HYPERLINK \l _bookmark15 结 论 31 HYPERLINK \l _bookmark16 第三部分 深度测序对单细胞 21-三体检测的初步研究 32 HYPERLINK \l _bookmark17 引 言 32 HYPERLINK \l _bookmark18 对象与方法 32 HYPERLINK \l _bookmark19 实验结果 35 HYPERLINK \l _bookmark20 讨 论 38 HYPERLINK \l _bookmark21 结 论 39 HYPERLINK \l _bookmark22 全文小结 40 HYPERLINK \l _bookmark23 参考文献 41 HYPERLINK \l _bookmark24 文献综述 46 HYPERLINK \l _bookmark25 攻读学位期间发表文章 54 HYPERLINK \l _bookmark26 致 谢 55 PAGE PAGE 1 中英文缩略词表 缩略语 英文全称 中文全称 PGS Preimplatation Genetic screening 胚胎植入前遗传学筛查 IVF FISH in vitro fertilization-embryo transfer fluorescent in site hybridization 体外受精-胚胎移植 原位荧光杂交 CGH comparative genetic hybridization 比较基因组杂交 aCGH Epidermal growth factor 微阵列比较基因组杂交 NGS next generation sequencing 新一代测序 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 SNP single nucleotide polymorphism 单核苷酸多态性 WGA whole genome amplification 单细胞全基因组扩增 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PEP primer extension preamplification 引物延伸预扩增 DOP degenerate oligonucleotide primed 简并寡核苷酸引物 MDA muticiple displacement amplification 多重置换扩增 PGD preimplatation genetic diagnosis 胚胎植入前遗传学诊断 ADO Allele drop out 等位基因脱扣 深度测序对单细胞 21-三体诊断的可行性研究 中文摘要 【背景】非整倍体是最常见的染色体异常，可导致胚胎停育与自发流产，是 限制试管婴儿成功率的重要原因之一。胚胎植入前遗传学筛查（preimplatation genetic screening，PGS）是筛选染色体数目和结构正常的胚胎进行移植，以此 期望提高移植成功率与妊娠率。目前 PGS 技术主要包括: 原位荧光杂交技术、比 较基因组杂交以及微阵列比较基因组杂交和单核苷酸多态性芯片技术等，但各项 技术均存在缺点。为了寻找一种更快速、全面检测非整倍体的方法，我们以二代 测序技术为基础，尝试一种新方法完成对单细胞 21-三体的诊断，从而建立该技术 平台为后续研