神经干细胞移植治疗大鼠脑梗死的实验分析-experimental analysis of neural stem cell transplantation in treating cerebral infarction in rats.docxVIP

中文摘 中文摘要 万方数据 万方数据 方法 用线栓法将成年雄性大鼠制成大脑中动脉脑梗死模型，模型成功后随机分 为实验组 25 只和对照组 25 只，取孕 15d 胎鼠的大脑皮层和海马区脑组织提取 培养的神经细胞，经 nestin 表达阳性鉴定为神经干细胞，实验组经尾静脉注射 1μL 神经干细胞悬液，对照组经尾静脉注射 1μL 生理盐水，在移植后 1d、3d、 7d、14d、28d 依据 Garcia 的 18 分评分法对各组大鼠的神经功能进行评分，行 脑灌注固定取材，通过免疫组织化学染色方法观察移植后神经干细胞的分化、 迁移和整合情况。 结果 1.体外分离培养的神经细胞在无血清培养液中形成大量的神经球。经 3—5 代传代的细胞生长稳定。经 nestin 染色鉴定大部分为阳性细胞，神经细胞球经 胎牛血清培养液贴壁培养后可分化为表达神经元特异烯醇化酶（NSE），胶质纤 维酸性蛋白（GFAP）、半乳糖脑苷脂（GALC）表达阳性的细胞。 2.移植后大鼠神经功能评分：缺血移植组大鼠的神经功能评分与对照组比 较显著升高（P0.05）；缺血移植组大鼠的神经功能评分在 28d 较 14d 时显著升 高（P0.05）。结果显示缺血移植组与对照组比较神经功能评分显著升高，结果 有差异性，结果差异显著（P0.05）。 3.免疫荧光染色，行免疫组织化学染色能够检测到存活的 Brdu 阳性细胞， 移植后 28d 可见移植细胞向周围迁移、分化，参与血管形成，并可见梗死区边 缘血管明显增生。实验组大鼠 GFAP 阳性细胞计数较对照组明显增多,结果差异 显著（P0.05）。 结论 1.从孕 15 天胎鼠大脑皮质和海马组织分离出的神经干细胞具有自我更新能 力和多向分化潜能，在 5%的胎牛血清培养液下神经干细胞具有向神经元和神经 胶质细胞分化的潜能。 2.神经干细胞移植后,在 28d 可见移植细胞向周围迁移、分化，参与血管形 成，并可见梗死区边缘血管明显增生。 3.在体外培养的神经干细胞能在脑梗死大鼠脑内存活、迁移和分化。 II 4.在体外培养的神经干细胞移植到脑梗死后大鼠体内，并且对脑梗死大鼠 的神经功能修复起到了积极的作用。 关键词：神经干细胞 移植 脑梗死。 III Abst Abstract The research of neural stem cell transplantation and improve nervefunction injury in rats with cerebral infarction Abstract Background At present, cerebral infarction (cerebral infarction) is the leading cause of human death and disability of the main diseases that endanger human health of. At present, cell damage and death caused by cerebral infarction is still no effective treatment. Once the ischemic injury of cerebral infarction can reach the maximum, can lead to irreversible neurological damage, to recover before the onset of the condition is very difficult. Even get timely treatment, many patients still lack permanent neurological function, left with varying degrees of disability. In recent years, researchers at home and abroad found a variety of treatment options, minimally invasive treatment from thrombolytic therapy, from the application of a variety of drugs or Chinese traditional medicine, to restore cerebral blood supply, protect the ischemic penumbra of brain tissue. Although these methods can improve the clinical symptoms