ABT1处理对降香黄檀硬枝扦插生根及其关联酶活性影响.docVIP

ABT1处理对降香黄檀硬枝扦插生根及其关联酶活性影响 　　摘要：为揭示降香黄檀（Dalbergia odorifera T.Chen）硬枝扦插苗的生根机制，取降香黄檀4年生母树上当年生硬枝制穗，比较50、100、200 mg/L ABT1生根剂处理的插穗，观测降香黄檀硬枝扦插苗的生根特性，研究扦插生根过程中过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、吲哚乙酸氧化酶（IAAO）等生根关联酶的活性变化。结果表明，降香黄檀属于愈伤组织生根类型，用100 mg/L的ABT1处理插穗，明显提高生根率和生根质量。在降香黄檀硬枝扦插生根过程中，相关联氧化酶活性均成规律性变化，其中PPO、SOD、IAAO的活性在扦插后逐渐升高，在根系形成期达到高峰，然后逐渐下降。而POD的活性在扦插后逐渐升高，在根系形成期达到高峰，然后逐渐下降，接着又逐渐升高，在根系伸长期达到另一个峰值，最后又逐渐下降，呈现双峰趋势。 　　关键词：ABT1生根剂；降香黄檀；硬枝扦插苗；关联酶；生根特性 　　中图分类号： S792.280.5文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）08-0138-04 　　降香黄檀（Dalbergia odorifera T.Chen）别称黄花梨，蝶形花科（Papilionaceae）黄檀属（Dalbergia）乔木，是海南省特有的珍稀濒危树种，国家二级保护植物[1]，木质结构细致、质地重、极耐腐、花纹美丽、芳香气味长留，是制造高档家具和精美工艺品的材料。降香黄檀具有极高的药用和经济价值，且耐干旱瘠薄，适应性强，是值得推广种植的珍贵树种[2]。降香黄檀一般采用播种、扦插的方式繁殖，但播种繁殖较慢，技术不成熟、不稳定，实生苗总量较少且优劣混杂，极大地限制了优质降香黄檀人工林规模化发展。因此，探索降香黄檀的无性繁殖技术尤为重要。目前研究多局限于多种因素影响下的降香黄檀扦插繁育技术体系，如前人研究的扦插基质、插条类型、激素类型、激素浓度、浸泡时间5个因素对降香黄檀插条生长指标的影响[3]，而对生根机制的研究鲜见报道。本研究探讨不同浓度的ABT1处理对降香黄檀硬枝扦插苗生根的影响，分析扦插生根过程中过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、吲哚乙酸氧化酶（IAAO）等生根关联酶活性变化，旨在为确定建立高效的降香黄檀扦插体系，加快降香黄檀树种推广提供科学的理论依据。 　　1试验地概况 　　在三亚学院园林教学试验苗圃进行试验。该地位于海南省三亚市吉阳区，地处109°53′92″E，18°32′72″N，海拔200 m。年平均气温25.4 ℃，7月平均最高气温28.3 ℃，1月平均最低气温20.7 ℃，紫外线强，光照充足，全年日照时间约 2 563 h。干、湿季节分明，7―11月为雨季，降水量占全年的85%。 　　2材料与方法 　　2.1扦插试验 　　于2016年4月初在三亚学院苗圃内进行扦插试验，插条取自三亚学院崖台山黄花梨种植园内，2012年栽植的降香黄檀母树基部当年萌芽条中生长健壮、?o病虫害的木质化硬枝。摘去下部叶片，保留2～3张上部叶片和顶芽，剪成长度为 8～10 cm的插穗，下切口平剪，用石蜡涂抹上切口，剪好的插穗每20根为1捆，用1 000倍多菌灵溶液浸泡20 min晾干后备用。扦插前用浓度为50、100、200 mg/L的ABT1溶液浸泡2 h，对照用蒸馏水浸泡2 h。扦插基质为珍珠岩、蛭石、细河沙的混合基质（体积比为5 ∶3 ∶2）。扦插后保持遮光率50%左右，相对湿度控制在70%～80%，温度控制在20～30 ℃，按照需要进行喷雾处理，常规管理。完全随机区组设计，每个处理80根插穗，3次重复。扦插深度为穗长的2/3，密度为50根/m2，保持基质湿润，每周消毒1次（多菌灵和甲基硫菌灵交替使用）。新叶完全展开后每隔15 d喷1次0.2%尿素溶液。 　　2.2测定指标 　　2.2.1生长形态指标扦插10 d后观察插穗愈伤组织形成情况和出现不定根的情况。以后每隔2～3 d观察1次，至切口愈合。统计和测定的指标有：愈伤组织出现期（d）、生根始期（d）、生根率（%）、不定根条数（条）、不定根长度（cm）。 　　2.2.2关联酶指标扦插后每隔4 d采样1次，每区随机取5株插穗，采样后洗净吸干水分，先观察生根情况，然后取插穗基部3 cm表皮部分别测定POD、PPO、SOD、IAAO的活性，3次重复。 　　2.3测定方法 　　PPO活性采用焦儿茶酚比色法方法[4]测定；POD活性采用愈创木酚法[5]测定；SOD活性采用氯化硝基氮蓝四唑法[5]测定；IAAO活性用比色方法[6]测定。PPO以1 g鲜样品 1 min 的D410 nm光密度变化0.01个单位所