10味温中散寒药对胃实寒证大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMPcGMP影响.docVIP

10味温中散寒药对胃实寒证大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMPcGMP的影响 　　[摘要] 目的：观察干姜、高良姜、丁香、小茴香、吴茱萸、肉桂、花椒、胡椒、荜茇、荜澄茄等10味温中散寒药对胃实寒证大鼠胃组织AC，PDE，cAMP，cGMP及cAMP/cGMP的影响，探讨温中散寒类中药温热药性的本质。方法：灌服4 ℃冰知母水提液复制大鼠胃实寒证模型，造模成功后随机分为模型组、阳性对照组、干姜组、高良姜组、丁香组、小茴香组、吴茱萸组、肉桂组、花椒组、胡椒组、荜茇组、荜澄茄组等10个治疗药组以及石膏、黄连2个反性药组，分别灌服相应的中药水煎液，观察各组中药对胃实寒证大鼠胃组织AC，PDE，cAMP，cGMP及cAMP/cGMP的影响。结果：10味温中散寒药能显著升高胃实寒证大鼠胃组织中AC含量（P0.05或P0.01），降低PDE含量（P0.05或P0.01），升高cAMP含量及cAMP/cGMP（P0.05或P0.01）。结论：温中散寒类中药是通过升高胃组织细胞内AC与cAMP含量、降低PDE含量、调节cAMP/cGMP稳定而呈现温热性能，从而发挥温中散寒功效，恢复胃的生理功能。 　　[关键词] 温中散寒药；胃实寒证；AC；PDE；cAMP；cGMP；cAMP/cGMP；药性本质 　　[收稿日期] 2013-02-02 　　[基金项目] 国家自然科学基金项目 　　[通信作者] 秦华珍，博士，教授，TelE-mail：qinhuazhen@126.com 　　温中散寒药药性皆属温热，主归脾胃经，功效温中散寒止痛，主要用治胃实寒证，证见脘腹冷痛，呕吐泄泻，舌淡苔白等。为了研究温中散寒类中药的药性本质，阐释温热药性的科学内涵，本研究以归脾胃经的干姜、高良姜、丁香、小茴香、吴茱萸、肉桂、花椒、胡椒、荜茇、荜澄茄等10味温中散寒药为研究对象，以归胃经的冰知母水煎液复制大鼠胃实寒证模型，选取辛热入脾的附子作为阳性对照药，并选取归胃经的寒性药石膏、黄连作为反性对照药，观察10味温中散寒药对胃实寒证大鼠胃组织腺苷酸环化酶（AC）、磷酸二酯酶（PDE）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）及cAMP/cGMP的影响。 　　1 材料 　　1.1 动物 SPF级SD大鼠，体重（250±20） g，雄性，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，合格证号SCXK（湘）2009-0004。 　　1.2 药物 知母、附子、干姜、高良姜、丁香、小茴香、吴茱萸、肉桂、花椒、胡椒、荜茇、荜澄茄、石膏、黄连等均购自南宁生源中药饮片有限责任公司，生产批号分别为111209，110113，110914，110608，111027，110824，110928，110927，110815，111021，110927，110921，110402，111014。经广西中医药大学中药鉴定学教研室田辉教授鉴定均为正品。 　　1.3 试剂 AC，PDE，cAMP，cGMP酶联免疫试剂盒均购自加拿大ELIXIR医药公司，生产批号分别为A233FC，P232FC，C062FS，C153FS。 　　1.4 仪器 BP211D万分之一电子天平（德国赛多利斯）；YKKYFM40制冰机（北京长流科学仪器公司）；SAITEXIANGYI.PGL-16冷冻离心机（湖南赛特湘仪离心机公司）；T-1000型电子天平[美国双杰兄弟（集团）有限公司双杰测试仪器厂，型号JJ2000]；EPOCH BIOTEK 全波长酶标仪（美国伯腾仪器有限公司）；TS-2000A其林贝尔脱色摇床（江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司）。 　　2 方法 　　2.1 药物剂量的确定 药物剂量换算按照以下公式：每天给药剂量=药典规定成人剂量上限×0.018a/0.2，a为相应倍数，具体倍数通过预实验结果得出。知母为成人剂量换算大鼠剂量的18倍即19.44 g?kg-1，各治疗药为成人剂量的10倍。 　　2.2 药物制备 取知母1 kg，加10倍量的水充分浸透，武火煮开后转文火保持微沸1 h，过滤，药渣加8倍量水再煎，时间40 min，过滤，合并2次滤液浓缩至0.5 g?mL-1生药浓度，分装保存于4 ℃冰箱备用。其余各组药物按照上法煎煮浓缩至所需浓度备用。 　　2.3 实验步骤 取大鼠150只，随机取其中10只作为空白对照组。其余动物用于复制胃实寒证模型。根据中医理论与胃实寒证的临床表现，胃实寒证常由多食生冷食物或寒邪直中脾胃所致，属于急病、暴病，具有病程短、及时有效治疗易康复的特点；并结合文献，采用灌服4 ℃冰知母水煎液的方法造模[1-2]，给药剂量20 mL?kg-1，每天2次，给药2 d。造模完成后随机分成14组，即：模型组、阳