CTGFTGF―β1和VEGF在不同分级肝硬化患者中表达及临床意义.docVIP

CTGFTGF―β1和VEGF在不同分级肝硬化患者中表达及临床意义 　　【摘要】 目的：探讨肝硬化患者血清结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子（TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEG）三者与Child-Pugh分级的相关性及其变化规律。方法：随机选取笔者所在医院188例肝硬化患者为观察组，其中肝硬化Child-Pugh分级是A级的患者为A组（n=64例）、肝硬化Child-Pugh分级是B级的患者为B组（n=64例）和肝硬化Child-Pugh分级是C级的患者为C组（n=60例），同期选择100例健康体检者作为对照组，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组血清CTGF、TGF-β1和VEGF及血清透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘蛋白（LN）和Ⅲ型前胶原（PCⅢ），对其结果进行比较分析。结果：观察组患者血清CTGF、TGF-β1和VEGF水平均明显高于对照组（P0.05），随着Child-Pugh分级的逐渐递增，血清CTGF、TGF-β1和VEGF水平呈进行性升高（P0.05），血清CTGF、TGF-β1和VEGF水平与血清透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘蛋白（LN）和Ⅲ型前胶原（PCⅢ）呈正相关（P0.01）。结论：肝硬化患者血清CTGF、TGF-β1和VEGF水平高于健康照组，而且随着肝硬化病程的发展，血清CTGF、TGF-β1和VEGF逐渐升高，与肝纤维化标志物呈正相关，CTGF、TGF-β1和VEGF对评估肝硬化严重程度和判断预后具有较高的临床价值。 　　【关键词】 肝硬化； 结缔组织生长因子； 转化生长因子； 血管内皮生长因子； Child-Pugh 　　中图分类号 R657.3 文献标识码 A 文章编号 1674-6805（2016）20-0007-03 　　肝硬化是由一种或多种病因长期或反复作用形成的弥漫性肝损害[1]。按Child-Pugh分级方法可分为A、B和C三个级别[2]。肝纤维化是慢性肝炎发展为肝硬化必经阶段的重要病理过程，最新的研究结果表明，结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子（TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEG）与多种原因所致的肝纤维化密切相关，它们在机体内均能诱导纤维母细胞细胞外基质成分基因的表达[3]，导致肝脏内纤维基质沉积增加，起了非常重要的作用，为此笔者采用酶联免疫吸附实验（ELISA）技术对慢性肝炎患者的血清标本进行CTGF、TGF-β1和VEGF水平检测，通过观察三者在慢性肝炎患者的血清的表达及定位情况，探讨三者与肝硬化Child-Pugh分级的相关性。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　随机选择2014年2月-2015年12月在笔者所在医院住院的188例肝硬化患者为观察组，其中男124例，女64例，年龄40～78岁，平均（41.5±8.5）岁，所有患者均依据肝脏穿刺活组织检查、MRI、CT、相关生化酶学检查结果和临床表现症状等明确并符合相关诊断标准[4]。所有患者主要的临床表现为食欲减退、呕吐及消化不良、偶伴恶心、全身疲力等症状，排除肝癌及其他恶性病变。其中乙型肝炎肝硬化118例、酒精性肝硬化26例和丙型肝炎肝硬化44例。上述患者根据Child-Pugh的肝功能分级积分标准分为：A级64例为A组、B级64例为B组和C级60例为C组。同期另选择100例健康体检者作为对照组，其中，男70例，女30例；年龄40～78岁，平均 （41.3±8.7）岁。各组性别和年龄比较差异无统计学意义（P0.05），具有可比性。该临床研究报医院伦理委员会通过，并与患者签署同意参加本实验研究同意书。 　　1.2 样本抽取 　　观察组患者入院后确诊为肝硬化，于肝硬化治疗前均空腹抽取肘静脉5 ml血标本，置于-4 ℃保存并1 h内分离血清，3000 r/min离心15 min，抽取上血清，并置于-80 ℃医学专用冰箱保存，同期对照组人群抽取空腹肘静脉5 ml血标本，血清分离保存方法同察组。 　　1.3 样本检测 　　CTGF、TGF-β1、VEGF、血清透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘蛋白（LN）和Ⅲ型前胶原（PCⅢ），其检测方法均使用ELISA，并由广州市金域检验集团合作提供检测并反馈检测结果。CTGF检测试剂盒由上海岚派生物科技有限公司提供，TGF-β1检测试剂盒由上海富众生物科技发展有限公司提供，VEGF检测试剂盒由上海信帆生物科技有限公司提供，HA检测试剂盒由上海酶联生物科技有限公司提供，Ⅳ-C检测试剂盒由上海安研商贸有限公司提供，LN检测试剂盒由上海古朵生物科技有限公司，PCⅢ检测试剂盒由上海康朗生物科技有限公司；RT-6500酶标分析仪由深圳市雷杜生命科学股份有限公司提供，PW-960酶标洗板机由深圳汇松科技发展有限